Informație

Prelegerea 27: Ciclul celular și Divizia celulară 2018 - Biologie


Cursul 27: Ciclul celular și Divizia celulară 2018

Divizia de celule - Prezentare PowerPoint PPT

PowerShow.com este un site de conducere de prezentare / prezentare de diapozitive. Indiferent dacă aplicația dvs. este de afaceri, instrucțiuni, educație, medicină, școală, biserică, vânzări, marketing, instruire online sau doar pentru distracție, PowerShow.com este o resursă excelentă. Și, cel mai bine, toate caracteristicile sale interesante sunt gratuite și ușor de utilizat.

Puteți utiliza PowerShow.com pentru a găsi și descărca exemple de prezentări online PowerPoint ppt despre orice subiect vă puteți imagina, astfel încât să puteți învăța cum să vă îmbunătățiți propriile diapozitive și prezentări gratuit. Sau folosiți-l pentru a găsi și descărca prezentări ppt PowerPoint de înaltă calitate cu diapozitive ilustrate sau animate care vă vor învăța cum să faceți ceva nou, de asemenea, gratuit. Sau utilizați-l pentru a încărca propriile diapozitive PowerPoint, astfel încât să le puteți împărtăși profesorilor, clasei, studenților, șefilor, angajaților, clienților, potențialilor investitori sau lumii. Sau folosiți-l pentru a crea prezentări de imagini foto foarte interesante - cu tranziții 2D și 3D, animație și alegerea dvs. de muzică - pe care le puteți partaja cu prietenii de pe Facebook sau cu cercurile Google+. Totul este gratuit, de asemenea!

Pentru o mică taxă, puteți obține cea mai bună confidențialitate online din industrie sau vă puteți promova public prezentările și prezentările de diapozitive cu clasamente de top. Dar, în afară de asta, este gratuit. Vom converti chiar și prezentările și prezentările de diapozitive în formatul Flash universal cu toată gloria lor multimedia originală, inclusiv animație, efecte de tranziție 2D și 3D, muzică încorporată sau alt sunet sau chiar videoclipuri încorporate în diapozitive. Totul gratuit. Majoritatea prezentărilor și prezentărilor de diapozitive de pe PowerShow.com pot fi vizualizate gratuit, multe fiind chiar descărcate gratuit. (Puteți alege dacă le permiteți oamenilor să descarce prezentările PowerPoint originale și prezentările de diapozitive foto contra cost sau gratuit sau deloc.) Consultați PowerShow.com astăzi - GRATUIT. Există cu adevărat ceva pentru toată lumea!

prezentări gratuite. Sau folosiți-l pentru a găsi și descărca prezentări ppt PowerPoint de înaltă calitate cu diapozitive ilustrate sau animate care vă vor învăța cum să faceți ceva nou, de asemenea, gratuit. Sau utilizați-l pentru a încărca propriile diapozitive PowerPoint, astfel încât să le puteți împărtăși profesorilor, clasei, studenților, șefilor, angajaților, clienților, potențialilor investitori sau lumii. Sau folosiți-l pentru a crea prezentări de imagini foto foarte interesante - cu tranziții 2D și 3D, animație și alegerea dvs. de muzică - pe care le puteți partaja cu prietenii de pe Facebook sau cu cercurile Google+. Totul este gratuit, de asemenea!


Declarație cu privire la pedeapsa necinstirii scolastice

Toate comunicările prin e-mail ale colegiului către studenți vor fi trimise exclusiv la contul ACCmail student și rsquos, cu așteptarea ca astfel de comunicări să fie citite în timp util. ACC va trimite informații importante și vă va notifica cu privire la orice situații de urgență legate de colegiu care utilizează acest cont. Studenții ar trebui să se aștepte să primească comunicări prin e-mail de la instructorul lor folosind acest cont. La fel, studenții ar trebui să își folosească contul ACCmail atunci când comunică cu instructorii și personalul.

Politica centrului de testare

În anumite circumstanțe, un instructor poate solicita studenților să susțină un examen într-un centru de testare. Studenții care utilizează Centrul de testare academică trebuie să se guverneze singuri în conformitate cu Ghidul studenților pentru utilizarea centrelor de testare ACC și ar trebui să citească întregul ghid înainte de a merge la examen. Pentru acest curs vom folosi centre de testare NRG și HLC. NU aduceți telefoane mobile la centrul de testare. Având telefonul mobil în sala de testare, indiferent dacă este activat sau dezactivat, vă va revoca privilegiile de testare pentru restul semestrului. Pentru a solicita un examen, trebuie să aveți:
&Taur ID de fotografie ACC
& Bull Abreviere curs (de ex., BIOL) și Număr curs (de ex. 1408)
& bull Course Sinonim (de exemplu, 15220) și Secțiunea de curs (de exemplu, 018)
Numele instructorului & bull & # 39


Link-uri către multe servicii pentru studenți și alte informații pot fi găsite la: http://www.austincc.edu/current/

Laboratoarele de învățare ACC oferă servicii de îndrumare gratuite tuturor studenților ACC înscriși în prezent la curs pentru a fi îndrumați. Programul tutorilor pentru fiecare laborator de învățare poate fi găsit la:
http://www.autincc.edu/tutor/students/tutoring.php

Pentru ajutor la configurarea ACC eID, ACC Gmail sau ACC Blackboard, consultați un tehnician de laborator de învățare la orice laborator de învățare ACC.

Politica oficială a Departamentului de biologie privind utilizarea de către studenți a organismelor în clasă și laborator:

Majoritatea claselor de biologie ACC, în special cele cu componente de laborator, folosesc organisme reale în timpul instrucțiunii, în plus față de imagini și modele. Studenții ACC se pregătesc, în general, pentru cariere din lumea reală care necesită lucrători cu experiență practică. Aceste cariere includ îngrijirea sănătății, munca veterinară, lucrările horticole și agricole. Alți studenți intenționează să se transfere la colegii de patru ani și vor participa la cercetări biologice, unde experiența practică este la fel de importantă.

Organismele utilizate la ACC sunt fundamentale în instruirea biologiei și sunt utilizate pentru a preda abilități și cunoștințe specifice. Starea și utilizarea lor variază de la un curs la altul. Elevii vor fi așteptați să participe activ la aceste activități. Studenții cu probleme speciale în această chestiune ar trebui să se consulte cu instructorul și / sau cu oficialii departamentali înainte de a se înscrie la un curs, astfel încât să poată ști ce li se va cere.

Unele organisme sunt observate vii, în timp ce altele sunt moarte și conservate în diferite moduri. Manipularea organismelor de către studenți, de la cultivarea organismelor vii la disecarea celor conservate. Unele exemple includ, dar nu se limitează la: cultivarea bacteriilor pentru cursuri de microbiologie disecție de pisici, porci sau șobolani pentru cursuri de anatomie examinarea scheletului și a pielii pentru biologia câmpului și utilizarea broaștelor în experimentele de fiziologie.


Mărimea nucleului crește pe măsură ce celulele de drojdie cresc

Nu se știe cum este setat volumul nucleului celular și nici cum se determină raportul dintre volumul nuclear și volumul celulei (N / C). Aici am măsurat dimensiunea nucleului din celulele în creștere ale drojdiei în devenire Saccharomyces cerevisiae. Analiza tulpinilor de drojdie mutante care se întind pe o gamă de dimensiuni ale celulelor a arătat că raportul dintre volumul mediu nuclear și volumul mediu al celulei a fost destul de consistent, volumul nuclear fiind de -7% din volumul celulei. La nivelul celulei unice, dimensiunea nucleară și celulară a fost puternic corelată în creșterea celulelor de tip sălbatic, așa cum este determinat de trei abordări microscopice diferite. Chiar și în faza G1, volumul nuclear a crescut, deși nu a crescut la fel de repede ca volumul celular global. Conținutul de ADN nu pare să aibă nicio influență imediată, directă asupra dimensiunii nucleare, deoarece dimensiunea nucleară nu a crescut brusc în timpul fazei S. Menținerea dimensiunii nucleare nu a necesitat o creștere continuă sau o biogeneză a ribozomilor, deoarece înfometarea și tratamentul cu rapamicină au avut un impact imediat mic asupra dimensiunii nucleare. Blocarea exportului nuclear de noi subunități ribozomale, printre alte proteine ​​și ARN-uri, cu leptomicină B nu a avut nici un efect evident asupra dimensiunii nucleare. Expansiunea nucleară trebuie acum luată în considerare în modele conceptuale și matematice de creștere și divizare a drojdiei în devenire. Aceste rezultate ridică întrebări cu privire la forța (forțele) necunoscută (e) care extind nucleul pe măsură ce celulele de drojdie cresc.


Dimensiunea nucleului crește pe măsură ce celulele de drojdie cresc

Nu se știe cum este setat volumul nucleului celular și nici cum se determină raportul dintre volumul nuclear și volumul celulei (N / C). Aici am măsurat dimensiunea nucleului din celulele în creștere ale drojdiei în devenire Saccharomyces cerevisiae. Analiza tulpinilor de drojdie mutante care se întind pe o gamă de dimensiuni ale celulelor a arătat că raportul dintre volumul mediu nuclear și volumul mediu al celulei a fost destul de consistent, volumul nuclear fiind de -7% din volumul celulei. La nivelul celulei unice, dimensiunea nucleară și celulară a fost puternic corelată în creșterea celulelor de tip sălbatic, așa cum este determinat de trei abordări microscopice diferite. Chiar și în faza G1, volumul nuclear a crescut, deși nu a crescut la fel de repede ca volumul celular global. Conținutul de ADN nu pare să aibă nicio influență imediată, directă asupra dimensiunii nucleare, deoarece dimensiunea nucleară nu a crescut brusc în timpul fazei S. Menținerea dimensiunii nucleare nu a necesitat o creștere continuă sau o biogeneză a ribozomilor, deoarece foametea și tratamentul cu rapamicină au avut un impact imediat mic asupra dimensiunii nucleare. Blocarea exportului nuclear de noi subunități ribozomale, printre alte proteine ​​și ARN-uri, cu leptomicină B nu a avut nici un efect evident asupra dimensiunii nucleare. Expansiunea nucleară trebuie acum luată în considerare în modele conceptuale și matematice de creștere și divizare a drojdiei în devenire. Aceste rezultate ridică întrebări cu privire la forța (forțele) necunoscută (e) care extind nucleul pe măsură ce celulele de drojdie cresc.


Extrage

Fundal

Proteina de zinc-deget 750 (ZNF750) este un potențial supresor tumoral în carcinomul cu celule scuamoase orale (OSCC). Cu toate acestea, mecanismele moleculare care stau la baza efectului său antitumoral rămân evazive în OSCC. Acest studiu a avut ca scop elucidarea genelor și căilor implicate în suprimarea tumorii în urma supraexprimării ZNF750 în linia celulară OSCC, celula CAL-27, utilizând abordarea genomică.

Metode

Bibliotecile de secvențe de ARN au fost construite și datele au fost analizate pentru a identifica gene exprimate diferențial (DEG) între grupurile vectoriale și grupurile ZNF750 (ZNF750 supra-exprimat în celula CAL-27). QPCR și western-blot au fost utilizate pentru a valida expresia diferențială a genelor candidate cu reglarea ciclului celular. Distribuția ciclului celular a fost analizată prin colorare BrdU.

Rezultate

Prin profilarea secvențierii ARN, 7.131 gene au fost exprimate diferențial în grupurile ZNF750. Dintre DEG-uri, 3.285 gene au fost reglate în sus, 3.846 gene au fost reglate în jos și 4.507 gene au fost identificate în trei categorii principale (componentă_celulară, proces biologic și funcție moleculară) bazate pe clasificarea ontologiei genice (GO). Analiza căilor de la Kyoto Encyclopedia of Genes and Genome (KEGG) a definit că DEG-urile ar putea fi clasificate în 280 de căi și au identificat primele două căi cele mai semnificative implicate în spliceozom și ciclul celular. Clasificarea funcțională și analiza de îmbogățire au arătat că majoritatea DEG-urilor implicate în activitatea de legare și catalitică și genele asociate ciclului celular au fost îmbogățite semnificativ ca răspuns la supraexprimarea ZNF750. ZNF750 a indus oprirea ciclului celular în faza G0 / G1 a ciclului celular.

Concluzie

Datele din acest studiu au arătat că calea ciclului celular a fost un factor cheie implicat în efectul antitumoral al ZNF750 în celulele CAL-27.


Publicații

Potențialul de dezvoltare al embrionilor umani aneuploizi cultivați dincolo de implantare.
Shahbazi MN, Wang T, Tao X, Weatherbee BAT, Sun L, Zhan Y, Keller L, Smith GD, Pellicer A, Scott RT Jr, Seli E, Zernicka-Goetz M.
Nat Commun. 2020 august 1011 (1): 3987. doi: 10.1038 / s41467-020-17764-7.

Exprimarea receptorului SARS-CoV-2 ACE2 și protează TMPRSS2 sugerează susceptibilitatea embrionului uman în primul trimestru.
Weatherbee BAT, Glover DM, Zernicka-Goetz M.
Deschideți Biol. 2020 august (8): 200162. doi: 10.1098 / rsob.200162. Epub 2020 5 aug.

Apoptoza mediată de autofagie elimină celulele aneuploide într-un model de mozaicism cromozomial la șoarece.
Singla S, Iwamoto-Stohl LK, Zhu M, Zernicka-Goetz M.
Nat Commun. 2020 iunie 1111 (1): 2958. doi: 10.1038 / s41467-020-16796-3.

Remodelarea membranei bazale reglează embriogeneza șoarecilor.
Kyprianou C, Christodoulou N, Hamilton RS, Nahaboo W, Boomgaard DS, Amadei G, Migeotte I, Zernicka-Goetz M.
Natură. 2020 iunie 582 (7811): 253-258. doi: 10.1038 / s41586-020-2264-2. Epub 2020 6 mai.

Trăind o viață dulce: Glucoza instruiește soarta celulară în embrionul șoarecelui.
Zhu M, Zernicka-Goetz M.
Dev Cell. 2020 apr 653 (1): 1-2. doi: 10.1016 / j.devcel.2020.03.012.

Analiza comparativă a dezvoltării umane și a șoarecilor: de la zigot la pre-gastrulare.
Molè MA, Weberling A, Zernicka-Goetz M.
Curr Top Dev Biol. 2020136: 113-138. doi: 10.1016 / bs.ctdb.2019.10.002. Epub 2019 26 decembrie.

Construirea unui domeniu apical în embrionul timpuriu al șoarecelui: lecții, provocări și perspective.
Zhu M, Zernicka-Goetz M.
Curr Opin Cell Biol. 2020 februarie 62: 144-149. doi: 10.1016 / j.ceb.2019.11.005. Epub 2019 21 decembrie Recenzie.

Autoorganizarea celulelor stem de șoarece într-un blastoid potențial extins.
Sozen B *, Cox AL *, De Jonghe J *, Bao M, Hollfelder F, Glover DM, Zernicka-Goetz M.
Dev Cell. Decembrie 1651 2019 (6): 698-712.e8. doi: 10.1016 / j.devcel.2019.11.014.

Morfogeneza țesuturilor extraembrionare dirijează remodelarea embrionului de șoarece la implantare.
Christodoulou N, Weberling A, Strathdee D, Anderson KI, Timpson P, Zernicka-Goetz M.
Nat Commun. 2019 august 710 (1): 3557. doi: 10.1038 / s41467-019-11482-5.

Autoorganizarea celulelor stem în embrioni: o fereastră asupra dezvoltării timpurii a mamiferelor.
Shahbazi MN, Siggia ED, Zernicka-Goetz M.
Ştiinţă. 2019 iunie 7364 (6444): 948-951. doi: 10.1126 / science.aax0164.

Diviziunile celulare concertate în endodermul visceral embrionar ghidează migrația endodermului visceral anterior.
Antonica F, Orietti LC, Mort RL, Zernicka-Goetz M.
Dev Biol. 2019 30 mar. Pii: S0012-1606 (18) 30795-4. doi: 10.1016 / j.ydbio.2019.03.016.

CARM1 și Paraspeckles reglează dezvoltarea embrionilor de șoareci pre-implantare.
Hupalowska A, Jedrusik A, Zhu M, Bedford MT, Glover DM, Zernicka-Goetz M.
Celulă. 2018 Dec 13175 (7): 1902-1916.e13. doi: 10.1016 / j.cell.2018.11.027.

Formarea secvențială și rezoluția mai multor rozete determină remodelarea embrionilor după implantare.
Christodoulou N, Kyprianou C, Weberling A, Wang R, Cui G, Peng G, Jing N, Zernicka-Goetz M.
Nature Cell Biology. 2018 noiembrie 20 (11): 1278-1289. doi: 10.1038 / s41556-018-0211-3. Epub 2018 15 octombrie.

Auto-asamblare a tipurilor de celule stem embrionare și a celor două extra-embrionare în structuri gastrulante asemănătoare embrionilor.
Berna Sozen, Gianluca Amadei, Andy Cox, Ran Wang, Ellen Na, Sylwia Czukiewska, Lia Chappell, Thierry Voet, Geert Michel, Naihe Jing, David M. Glover & amp Magdalena Zernicka-Goetz.
Nature Cell Biology. 2018 08 august 20: 979–989. doi: 10.1038 / s41556-018-0187-z

Deconstruirea și reconstituirea șoarecelui și a embrionului timpuriu uman.
Shahbazi MN, Zernicka-Goetz M.
Nature Cell Biology. 2018 08 august, 878-887. doi: 10.1038 / s41556-018-0144-x

Generarea in vitro de structuri similare embrionilor polarizate de șoarece din celule stem embrionare și trofoblaste.
Harrison SE, Sozen B, Zernicka-Goetz M.
Protocoale ale naturii. 2018 iulie 13 (7): 1586-1602. doi: 10.1038 / s41596-018-0005-x.

Tranzițiile de stare pluripotente coordonează morfogeneza la embrioni de șoarece și umani.
Shahbazi MN, Scialdone A, Skorupska N, Weberling A, Recher G, Zhu M, Jedrusik A, Devito LG, Noli L, Macaulay IC, Buecker C, Khalaf Y, Ilic D, Voet T, Marioni JC, Zernicka-Goetz M.
Natură. 2017 Dec 14552 (7684): 239-243. doi: 10.1038 / nature24675.

Polarizarea actomiozinei prin PLC-PKC declanșează ruperea simetriei embrionului de șoarece.
Zhu M, Leung CY, Shahbazi MN, Zernicka-Goetz M.
Nat Commun. 2017 octombrie 138 (1): 921. doi: 10.1038 / s41467-017-00977-8.

Activarea întârziată APC / C extinde prima mitoză a embrionilor de șoarece.
Ajduk A, Strauss B, Pines J, Zernicka-Goetz M.
Sci Rep. 2017 Aug 297 (1): 9682. doi: 10.1038 / s41598-017-09526-1.

Modificatorul de cromatină Satb1 reglează soarta celulei prin semnalizarea Fgf la embrionul timpuriu al șoarecelui.
Goolam M, Zernicka-Goetz M.
Dezvoltare. 2017 apr 15144 (8): 1450-1461. doi: 10.1242 / dev.144139. Epub 2017 13 mar.

Asamblarea celulelor stem embrionare și extraembrionare pentru a imita embriogeneza in vitro.
Harrison SE, Sozen B, Christodoulou N, Kyprianou C, Zernicka-Goetz M.
Ştiinţă. 2017 apr 14356 (6334). pii: eaal1810. doi: 10.1126 / science.aal1810. Epub 2017 2 mar.

Autoorganizarea embrionului uman în absența țesuturilor materne.
Shahbazi MN, Jedrusik A, Vuoristo S, Recher G, Hupalowska A, Bolton V, Fogarty NM, Campbell A, Devito LG, Ilic D, Khalaf Y, Niakan KK, Fishel S, Zernicka-Goetz M.
Nat Cell Biol. 2016 iunie 18 (6): 700-8. doi: 10.1038 / ncb3347. Epub 2016 4 mai.

Autoorganizarea embrionului uman atașat in vitro.
Deglincerti A, Croft GF, Pietila LN, Zernicka-Goetz M, Siggia ED, Brivanlou AH.
Natură. 2016 mai 4533 (7602): 251-4. doi: 10.1038 / nature17948.

Modelul mouse-ului de mozaicism cromozomial relevă epuizarea specifică liniei de celule aneuploide și potențialul normal de dezvoltare.
Bolton H, Graham SJ, Van der Aa N, Kumar P, Theunis K, Fernandez Gallardo E, Voet T, Zernicka-Goetz M.
Nat Commun. 2016 Mar 297: 11165. doi: 10.1038 / ncomms11165.

Eterogenitatea în Oct4 și Sox2 țintește Biases Destinul celular în embrionii de șoarece cu 4 celule.
Goolam M, Scialdone A, Graham SJ, Macaulay IC, Jedrusik A, Hupalowska A, Voet T, Marioni JC, Zernicka-Goetz M.
Celula. 2016 mar 24165 (1): 61-74. doi: 10.1016 / j.cell.2016.01.047.

Achiziționarea destinului celular în dezvoltarea șoarecilor: Cum celulele devin mai întâi eterogene?
Graham SJ, Zernicka-Goetz M.
Curr Top Dev Biol. 2016117: 671-95. doi: 10.1016 / bs.ctdb.2015.11.021. Epub 2016 21 ianuarie.

Complexul de remodelare a cromatinei BAF este un regulator epigenetic al specificațiilor genealogice la embrionul timpuriu al șoarecelui.
Panamarova M, Cox A, Wicher KB, Butler R, Bulgakova N, Jeon S, Rosen B, Seong RH, Skarnes W, Crabtree G, Zernicka-Goetz M.
Dezvoltare. 2016 apr 15143 (8): 1271-83. doi: 10.1242 / dev.131961. Epub 2016 7 mar.

Expresia excesivă a Plk4 induce amplificarea centrosomului, pierderea cililor primari și a hiperplaziei tisulare asociate la șoarece.
Coelho PA, Bury L, Shahbazi MN, Liakath-Ali K, Tate PH, Wormald S, Hindley CJ, Huch M, Archer J, Skarnes WC, Zernicka-Goetz M, Glover DM.
Deschideți Biol. 5 decembrie 2015 (12): 150209. doi: 10.1098 / rsob.150209.

Polaritatea și orientarea diviziunii celulare în embrionul de decolteu: de la vierme la om.
Ajduk A, Zernicka-Goetz M.
Mol Hum Reprod. 2015 Dec 9. pii: gav068. [Epub înainte de tipărire]

Cartografierea călătoriei de la totipotență la specificația descendenței în embrionul mouse-ului.
Leung CY, Zernicka-Goetz M.
Curr Opin Genet Dev. 2015 Oct34: 71-6. doi: 10.1016 / j.gde.2015.08.002. Epub 2015 Sep 3. Recenzie.

Dezvoltarea axului anterior-posterior este un proces de auto-organizare în absența unor indicii materne la embrionul șoarecelui.
Bedzhov I, Bialecka M, Zielinska A, Kosalka J, Antonica F, Thompson AJ, Franze K, Zernicka-Goetz M.
Rez. Celulare Decembrie 2015 (12): 1368-71. doi: 10.1038 / cr.2015.104. Epub 2015 4 sept.

G & ampT-seq: secvențierea paralelă a genomilor și transcriptomilor cu o singură celulă.
Macaulay IC, Haerty W, Kumar P, Li YI, Hu TX, Teng MJ, Goolam M, Saurat N, Coupland P, Shirley LM, Smith M, Van der Aa N, Banerjee R, Ellis PD, Quail MA, Swerdlow HP, Zernicka-Goetz M, Livesey FJ, Ponting CP, Voet T.
Metode Nat. 2015 iunie 12 (6): 519-22. doi: 10.1038 / nmeth.3370. Epub 2015 27 apr.

Moartea celulară și morfogeneza în timpul dezvoltării timpurii a șoarecilor: sunt interconectate?
Bedzhov I, Zernicka-Goetz M.
Bioessays. 2015 aprilie 37 (4): 372-8. doi: 10.1002 / bies.201400147. Epub 2015 15 ianuarie.

Jedrusik A, Cox A, Wicher K, Glover D, Zernicka-Goetz M.
Knockout-ul matern-zigot relevă un rol critic al Cdx2 în tranziția morula către blastocist.
Dev Biol. 2014 Dec 12. pii: S0012-1606 (14) 00630-7. doi: 10.1016 / j.ydbio.2014.12.004. [Epub înainte de tipărire]

Graham SJ, Wicher KB, Jedrusik A, Guo G, Herath W, Robson P, Zernicka-Goetz M.
Semnalizarea BMP reglează dezvoltarea pre-implantare a liniilor de celule extraembrionare din embrionul de șoarece.
Nat Commun. 165 decembrie 2014: 5667. doi: 10.1038 / ncomms6667.

Bedzhov I, Leung CY, Bialecka M, Zernicka-Goetz M.
Cultura in vitro a blastocistilor de șoarece dincolo de etapele de implantare.
Nat Protoc. 9 decembrie 2014 (12): 2732-9. doi: 10.1038 / nprot.2014.186. Epub 2014 30 oct.

Ajduk A, Biswas Shivhare S, Zernicka-Goetz M.
Poziția bazală a nucleelor ​​este o condiție prealabilă pentru diviziunile celulare asimetrice în embrionul timpuriu al șoarecelui.
Dev Biol. 2014 august 15392 (2): 133-40. doi: 10.1016 / j.ydbio.2014.05.009. Epub 2014 20 mai.

Bedzhov I, Zernicka-Goetz M
Proprietățile de autoorganizare ale celulelor pluripotente ale șoarecilor inițiază morfogeneza la implantare.
Celula. 2014 februarie 27156 (5): 1032-44. doi: 10.1016 / j.cell.2014.01.023. Epub 2014 13 februarie.

Christophorou MA, Castelo-Branco G, Halley-Stott RP, Oliveira CS, Loos R, Radzisheuskaya A, Mowen KA, Bertone P, Silva JC, Zernicka-Goetz M, Nielsen ML, Gurdon JB, Kouzarides T
Citrullination reglează pluripotența și legarea histonei H1 de cromatină.
Natură. 2014 Mar 6507 (7490): 104-8. doi: 10.1038 / nature12942. Epub 2014 26 ianuarie.

Coelho PA, Bury L, Sharif B, Riparbelli MG, Fu J, Callaini G, Glover DM, Zernicka-Goetz M
Formarea fusului în embrionul de șoarece necesită Plk4 în absența centriolilor.
Dev Cell. 9 decembrie 2013 (5): 586-97. doi: 10.1016 / j.devcel.2013.09.029. Epub 2013 21 noiembrie.

Morris SA, Graham SJL, Jedrusik A, Zernicka-Goetz M
Răspunsul diferențial la semnalizarea Fgf în celule internalizate în momente diferite influențează segregarea liniei în embrionii de șoarece preimplantatori.
Deschideți Biol. 2013 20 noiembrie 130104

Duan EK, Wang H, Zernicka-Goetz M
Introducere în numărul special „Jucători moleculari în timpul sarcinii timpurii”.
Mol Aspects Med. 2013 Oct34 (5): vi-vii. doi: 10.1016 / S0098-2997 (13) 00054-X

Leung CY, Zernicka-Goetz M
Angiomotina previne diferențierea liniei pluripotente la embrionii șoarecilor prin mecanisme dependente și independente de calea Hippo.
Nat Commun. 20134: 2251. doi: 10.1038 / ncomms3251.

Skamagki M, Wicher KB, Jedrusik A, Ganguly S, Zernicka-Goetz M
Localizarea asimetrică a ARNm-ului Cdx2 în timpul primei decizii destinate celulei în dezvoltarea timpurie a șoarecilor.
Rep. Cell.2013 21 februarie 3 (2)

Morris SA, Guo Y, Zernicka-Goetz M.
Plasticitatea dezvoltării este legată de pluripotență și de căile de semnalizare fgf și wnt.
Cell Rep. 2012 Oct 252 (4): 756-65

Morris SA, Zernicka-Goetz M.
Formarea tipurilor de celule distincte în blastocistul șoarecelui.
Rezultate Problemă Cell Differ. 201255: 203-17

Ajduk A, Zernicka-Goetz M.
Progrese în metodele de selecție a embrionilor.
F1000 Biol Rep .. 20124: 11

Morris SA, Grewal S, Barrios F, Patankar SN, Strauss B, Buttery L, Alexander M, Shakesheff KM, Zernicka-Goetz M.
Dinamica formării axului anterior-posterior în embrionul de șoarece în curs de dezvoltare.
Nat Commun. 2012 februarie 143: 673.

Ajduk A, Ilozue T, Windsor S, Yu Y, Seres KB, Bomphrey RJ, Tom BD, Swann K, Thomas A, Graham C, Zernicka-Goetz M.
Contracțiile ritmice antrenate de actomiozină induse de intrarea spermei prezic viabilitatea embrionului mamifer.
Nat Commun. 92 august 2011: 417.

Zernicka-Goetz M.
Proclamarea soartei la embrionul timpuriu al șoarecelui.
Nat Cell Biol. 13 februarie 2011 (2): 112-4.

Sharif B, Na J, Lykke-Hartmann K, McLaughlin SH, Laue E, Glover DM, Zernicka-Goetz M.
Complexul de pasageri al cromozomului este necesar pentru fidelitatea transmiterii cromozomului și citokineza în meioza ovocitelor de șoarece.
J Cell Sci. 2010 Dec 15123 (Pt 24): 4292-300.

Zernicka-Goetz M, Huang S.
Stochasticitate versus determinism în dezvoltare: o dihotomie falsă?
Nat Rev Genet. 11 noiembrie 2010 (11): 743-4.

Parfitt DE, Zernicka-Goetz M.
Modificare epigenetică care afectează expresia polarității celulei și a genelor destinului celulei pentru a regla specificația descendenței la embrionul timpuriu al șoarecelui.
Mol Biol Cell. 121 august 2010 (15): 2649-60.

Jedrusik A, Bruce AW, Tan MH, Leong DE, Skamagki M, Yao M, Zernicka-Goetz M.
Cdx2 furnizat maternal și zigotic are roluri noi și critice pentru dezvoltarea timpurie a embrionului de șoarece.
Dev Biol. 27 aprilie 2010.

Morris SA, Teo RT, Li H, Robson P, Glover DM, Zernicka-Goetz M.
Originea și formarea primelor două tipuri de celule distincte ale masei celulare interne din embrionul șoarecelui.
Proc Natl Acad Sci U S A. 2010 22 mar.

Wu Q, Bruce AW, Jedrusik A, Ellis PD, Andrews RM, Langford CF, Glover DM, Zernicka-Goetz M.
CARM1 este necesar în celulele stem embrionare pentru a menține pluripotența și a rezista diferențierii.
Celule stem. 2009 noiembrie 27 (11): 2637-45.

Zernicka-Goetz M, Morris SA, Bruce AW.
Luarea unei decizii ferme: reglarea multifacetică a soartei celulare la embrionul timpuriu al șoarecelui.
Nat Rev Genet. 2009 10 iulie (7): 467-77.

Meilhac SM, Adams RJ, Morris SA, Danckaert A, Le Garrec JF, Zernicka-Goetz M.
Mișcările active ale celulelor cuplate cu inducția pozițională sunt implicate în segregarea liniei în blastocistul șoarecelui.
Dev Biol. 2009 iulie 15331 (2): 210-21. Epub 2009 5 mai.

Jedrusik A, Parfitt DE, Guo G, Skamagki M, Grabarek JB, Johnson MH, Robson P, Zernicka-Goetz M.
Rolul Cdx2 și polaritatea celulei în alocarea celulei și specificarea trofectodermului și a masei celulare interne în embrionul de șoarece.
Gene Dev. 122 octombrie 2008 (19): 2692-706.

Lykke-Andersen K, Gilchrist MJ, Grabarek JB, Das P, Miska E, Zernicka-Goetz M.
Argonautul matern 2 este esențial pentru dezvoltarea timpurie a șoarecilor la tranziția materno-zigotică.
Mol Biol Cell. 19 octombrie 2008 (10): 4383-92.

Soares ML, Torres-Padilla ME, Zernicka-Goetz M.
Semnalizarea proteinei morfogenetice osoase 4 reglează dezvoltarea endodermului visceral anterior la embrionul șoarecelui.
Creșterea dev diferă. 50 septembrie 2008 (7): 615-21.

Bischoff M, Parfitt DE, Zernicka-Goetz M.
Formarea axei embrion-abembrionare a blastocistului șoarecelui: relații între orientarea diviziunilor de clivaj timpuriu și modelul diviziunilor simetrice / asimetrice.
Dezvoltare. 2008 Mar135 (5): 953-62.

Perea-Gomez A, Meilhac SM, Piotrowska-Nitsche K, Grey D, Collignon J, Zernicka-Goetz M.
Regionalizarea endodermului visceral al șoarecelui pe măsură ce blastocistul se transformă în cilindrul oului.
BMC Dev Biol. 2007 august 167: 96.

Torres-Padilla ME, Richardson L, Kolasinska P, Meilhac SM, Luetke-Eversloh MV, Zernicka-Goetz M.
Endodermul visceral anterior al embrionului de șoarece este stabilit atât din celulele precursoare preimplantare, cât și prin expresia genică de novo după implantare.
Dev Biol. 2007 septembrie 1309 (1): 97-112.

Frankenberg S, Smith L, Greenfield A, Zernicka-Goetz M.
Modele noi de expresie genică de-a lungul axei proximo-distale ale embrionului șoarecelui înainte de gastrulare.
BMC Dev Biol. 15 februarie 2007: 8.

Torres-Padilla ME, Parfitt DE, Kouzarides T, Zernicka-Goetz M.
Metilarea histonei argininei reglează pluripotența la embrionul timpuriu al șoarecelui.
Natură. 2007 ianuarie 11445 (7124): 214-8.

Na J, Lykke-Andersen K, Torres Padilla ME, Zernicka-Goetz M.
Proteinele dezordonate reglează aderența celulelor în blastocistul șoarecilor și servesc la monitorizarea modificărilor semnalizării Wnt.
Dev Biol. 2007 februarie 1302 (1): 40-9.

Torres-Padilla ME, Zernicka-Goetz M.
Rolul TIF1alpha ca modulator al transcripției embrionare în zigotul șoarecelui.
J Cell Biol. 2006 iulie 31174 (3): 329-38.

Zernicka-Goetz M.
Primele decizii despre soarta celulei în embrionul șoarecelui: destinul este o chestiune atât de șansă, cât și de alegere.
Curr Opin Genet Dev. 16 august 2006 (4): 406-12.

Na J, Zernicka-Goetz M.
Poziționarea și organizarea asimetrică a fusului meiotic al ovocitelor de șoarece necesită funcția CDC42.
Curr Biol. 2006 iunie 2016 (12): 1249-54.

Torres-Padilla ME, Bannister AJ, Hurd PJ, Kouzarides T, Zernicka-Goetz M.
Distribuția dinamică a variantei de înlocuire a histonei H3.3 în embrionii ovocitului de șoarece și preimplantare.
Int J Dev Biol. 200650 (5): 455-61.

Richardson L, Torres-Padilla ME, Zernicka-Goetz M.
Semnalizarea regionalizată în ectoderma extraembrionară reglează poziționarea endodermului visceral anterior în embrionul de șoarece.
Mech Dev. 2006 aprilie 123 (4): 288-96.

Soares ML, Haraguchi S, Torres-Padilla ME, Kalmar T, Carpenter L, Bell G, Morrison A, Ring CJ, Clarke NJ, Glover DM, Zernicka-Goetz M.
Studii funcționale ale căilor de semnalizare în dezvoltarea peri-implantare a embrionului de șoarece de către ARNi.
BMC Dev Biol. 2005 5:28.

Zernicka-Goetz M.
Biologie celulară a dezvoltării: model de clivaj și asimetrie emergentă a embrionului de șoarece.
Nat Rev Mol Cell Biol. 2005 6: 919-28.

Moore CA, Zernicka-Goetz M.
PAR-1 și proteinele asociate microtubulilor CLASP2 și dinactin-p50 au localizare specifică pe meioticul șoarecilor și primii fusuri mitotici.
Reproducere. 2005 130: 311-20.

Piotrowska-Nitsche K, Zernicka-Goetz M
Aranjamentul spațial al blastomerilor individuali cu 4 celule și ordinea în care sunt generați se corelează cu modelul blastocistului la embrionul de șoarece.
Mech Dev. 2005 122: 487-500.

Plusa B, Hadjantonakis AK, Gray D, Piotrowska-Nitsche K, Jedrusik A, Papaioannou VE, Glover DM, Zernicka-Goetz M.
Primul decolteu al zigotului șoarecului prezice axa blastocistului.
Natură. 2005 434: 391-5.

Plusa B, Frankenberg S, Chalmers A, Hadjantonakis AK, Moore CA, Papalopulu N, Papaioannou VE, Glover DM, Zernicka-Goetz M.
Reglarea descendentă a funcției Par3 și aPKC direcționează celulele către ICM în embrionul de șoarece de preimplantare.
J Cell Sci. 2005 118: 505-15.

Piotrowska-Nitsche K, Perea-Gomez A, Haraguchi S, Zernicka-Goetz M.
Blastomerii de șoarece cu patru celule au proprietăți de dezvoltare diferite.
Dezvoltare. 2005 februarie 132 (3): 479-91.

Tâmplar L, Zernicka-Goetz M.
Direcționarea diferențierii celulare pluripotente utilizând „ARN cotat” în transfecție tranzitorie.
Geneză. 2004 noiembrie 40 (3): 157-63.

Zernicka-Goetz M.
Primele decizii despre soarta celulei și modelarea spațială la embrionul timpuriu al șoarecelui.
Semin Cell Dev Biol. 2004 5: 563-72.

Mesnard D, Filipe M, Belo JA, Zernicka-Goetz M.
Axul anterior-posterior apare cu respectarea morfologiei embrionului șoarecelui care se modifică și se aliniază cu uterul înainte de gastrulare.
Biol actual. 2004 14: 184-96.

Gray, D., Plusa, B., Piotrowska, K., Glover, D. M., Tom, B. și Zernicka-Goetz, M.
Primul decolteu al embrionului de șoarece răspunde la geometria ovulelor care reflectă poziția intrării spermei.
Biol actual. 2004 9: 397-405.

Wang, Q.T., Piotrowska, K., Ciemerych, M.A., Milenkovic, L., Scott, M.P., Davis, R.W. și Zernicka-Goetz, M.
Un studiu la nivelul genomului asupra activității genetice relevă căile de semnalizare a dezvoltării embrionului de șoarece preimplantator.
Developmental Cell 2004 ianuarie: 6, 133-144.

Grabarek JB, Zernicka-Goetz M.
Interferența ARN în sistemele de mamifere - o abordare practică.
Adv Exp Med Biol. 2003544: 205-16.

Plusa B., Grabarek J.B., Piotrowska K., Glover D.M, Zernicka-Goetz M.
Locul diviziunii meiotice anterioare definește orientarea clivajului la embrionul șoarecelui.
Nat Cell Biol. 2002 4: 811-5.

Grabarek JB, Wianny F, Plusa B, Zernicka-Goetz M, Glover DM.
Interferența ARN prin producția de dsARN de ac de păr scurt în celulele ES, derivații diferențiați ai acestora și în liniile celulare somatice.
Biotehnici. 2003 34: 734-6, 739-44.

Zernicka-Goetz M.
Determinarea primului decolteu al zigotului șoarecelui.
Reprod Biomed online. 2003 6: 160-163.

Durcova-Hills G, Wianny F, Merriman J, Zernicka-Goetz M, McLaren A.
Soarta de dezvoltare a celulelor germinale embrionare (EGC), in vivo și in vitro.
Diferenţiere. 2003 71: 135-41.

Piotrowska K, Zernicka-Goetz M.
Modelarea timpurie a embrionului de șoarece - contribuții ale spermei și ovulului.
Dezvoltare. 2002. 129: 5803-13.

Grabarek JB, Plusa B, Glover DM, Zernicka-Goetz M.
Livrarea eficientă a ARNd-ului în ovocitele de șoareci închise în zonă și embrioni preimplantatori prin electroporare.
Geneza, 2002. 32: 269-76.

Plusa B, Piotrowska K, Zernicka-Goetz M.
Poziția de intrare a spermei oferă un marker de suprafață pentru primul plan de decolteare al zigotului șoarecelui. Geneza, 2002. 32: 193-8.
Zernicka-Goetz M.

Modelarea embrionului: primele decizii spațiale din viața unui șoarece.
Dezvoltare, 2000. 129: 815-29.
Piotrowska K, Wianny F, Pedersen RA, Zernicka-Goetz M.

Blastomerele care apar din prima diviziune de decolteare au destine distincte în dezvoltarea normală a șoarecilor.
Dezvoltare, 2001. 128: 3739-40.

Zernicka-Goetz M, Pines J.
Utilizarea proteinei fluorescente verzi la embrionii de șoarece.
Metode 2000. 24: 55-60.

Piotrowska, K. și Zernicka-Goetz, M.
Rolul spermei în modelarea spațială a embrionului timpuriu al șoarecelui.
Nature 2001. 409: 517-521.

Wianny, F și Zernicka-Goetz, M.
Interferența specifică cu funcția genică de ARN dublu catenar la șoarece.
Nature Cell Biology, 2000. 2: 70-75.

Ciemerych MA, Mesnard D, Zernicka-Goetz M.
Polii animale și vegetali ai oului de șoarece predic polaritatea axei embrionare, dar sunt neesențiali pentru dezvoltare.
Dezvoltare, 2000. 16: 3467-74.

Zernicka-Goetz M.
Sărind arma pe expresia genei șoarecilor.
Natura, 2000. 6788: 733.

Grabarek J, Zernicka-Goetz M.
Progresia ovocitelor de șoarece de la metafaza I la metafaza II este inhibată prin fuziunea cu celulele G2.
Zigot 2000. 8: 145-51.

Zernicka-Goetz M, Pines J.
Analiza genealogiei celulare. Aplicații ale proteinei fluorescente verzi.
Methods Mol Biol, 2000. 135: 279-87.

Weber, R., Wianny, F., Evans, M.J., Pedersen, R. și Zernicka-Goetz, M.
Polaritatea embrionului de șoarece este anticipată înainte de implantare.
Dezvoltare, 1999. 126: 5591-5598.

Wianny F, Tavares A, Evans MJ, Glover DM, Zernicka-Goetz M.
Kinaza 1 asemănătoare poloului se asociază cu polii fusului acentriolar, cromozomii meiotici și zona mediană a fusului în timpul maturării ovocitelor.
Chromosoma, 1998. 6-7: 430-9.

Zernicka-Goetz M.
Descendenți fertili derivați din ouă de mamifere lipsiți fie de poli de animale, fie de vegetali.
Dezvoltare, 1998. 23: 4803-8.

Zernicka-Goetz M, Pines J, McLean Hunter S, Dixon JP, Siemering KR, Haseloff J, Evans MJ.
În urma soartei celulare în embrionul viu al șoarecelui.
Dezvoltare, 1997. 6: 1133-7.

Zernicka-Goetz M, Verlhac MH, Geraud G, Kubiak JZ.
Fosfatazele proteice controlează activarea kinazei MAP și organizarea microtubulilor în timpul maturării ovocitelor de șobolan.
Eur J Cell Biol. 1997. 1: 30-8.

Zernicka-Goetz M, Pines J, Ryan K, Siemering KR, Haseloff J, Evans MJ, Gurdon JB.
Un marker de linie de neșters pentru Xenopus utilizând o proteină fluorescentă verde mutantă.
Dezvoltare. 1996. 2: 3719-24.

Zernicka-Goetz M, Ciemerych MA, Kubiak JZ, Tarkowski AK, Maro B.
Inactivarea factorului citostatic este indusă de un mecanism dependent de calciu prezent până la cel de-al doilea ciclu celular în ovulele de șoarece fertilizate, dar nu și activate partenogenetic.
J Cell Sci. 1995. Pt 2: 469-74.

Zernicka-Goetz M.
Activarea genelor embrionare în timpul dezvoltării șobolanului preimplantare.
Mol Reprod Dev, 1994. 1: 30-5.

Zernicka-Goetz M, Maro B.
Acidul okadaic afectează organizarea fusului în ovocitele de șobolan arestați cu metafaza II.
Exp Cell Res, 1993. 1: 189-93.

Zernicka-Goetz M, Weber M, Maro B.
Activarea completă a ovocitului de șobolan prin inhibarea sintezei proteinelor necesită activitate de fosfatază proteică.
Int J Dev Biol. 1993. 2: 273-7.

Zernicka-Goetz M, Kubiak JZ, Antony C, Maro B.
Organizarea cito-scheletică a ovocitelor de șobolan în timpul arestării metafazei II și după activarea abortivă: un studiu prin microscopie de scanare confocală cu laser.
Mol Reprod Dev, 1993. 2: 165-75.

Zernicka-Goetz M.
Activarea spontană și indusă a ovocitelor de șobolan.
Mol Reprod Dev. 1991. 2: 169-76.


MATERIALE ȘI METODE

Tulpini de drojdie, cultură și droguri

S-a descris cultura drojdiei, inclusiv analiza mărimii cu un analizor de particule Coulter, analiza de sortare a celulelor activate prin fluorescență (FACS) și selectarea mărimii celulare prin elutriere centrifugă (Futcher, 1999 Jorgensen și colab., 2002). Tulpinile de drojdie sunt enumerate în tabelul 1. Alele de bud21::BUD21 YFP -his5 + și sec63::SEC63 CFP -kanR were generated by genomic integration of standard C-terminal tagging cassettes that were PCR-amplified with integration site-specific primers. Template plasmids for cyan and yellow fluorescent protein (CFP and YFP, respectively) fusions were obtained from the Yeast Resource Center (University of Washington, Seattle). whi și CLN3 alleles have been described previously (Jorgensen și colab., 2002). Synthetic complete medium is 0.2% amino acid mix, 0.17% yeast nitrogen base without amino acids and ammonium sulfate, 0.5% ammonium sulfate supplemented with 3% ethanol, 2% glucose, 2% raffinose, or 2% galactose, as indicated. YEP medium is 2% peptone, 1% yeast extract supplemented with 3% ethanol or 2% glucose, as indicated. Rapamycin and leptomycin B (LMB) were obtained from Sigma and were used at working concentrations of 0.2 μg/ml and 100 ng/ml, respectively.

Table 1. Strains used in this study

Microscopy and Morphometry

Sec63 CFP Reporter.

All experiments in Figures 1 –3 and 6 were performed with log phase cells at 30°C with OD600 <0.5 and cell concentration <3 × 10 7 cells/ml to prevent inadvertent nutrient depletion. Log phase cultures in synthetic media were rapidly concentrated by centrifugation. Medium, 2.5 μl, with concentrated live cells was mounted at room temperature and immediately visualized. Cell fields were imaged within 5 min of being removed from the 30°C incubator.

For Cells in Figures 1, 2, and 3, A and B.

Each cell field was sequentially imaged by differential interference contrast (DIC) and epifluorescent microscopy with an Eclipse E600FN microscope (100× objective, Plan Apo, Nikon, Melville, NY) and an Orca II CCD camera (Hamamatsu, Bridgewater, NJ). Sec63 CFP signal delineated the nuclear and cell envelopes. Metamorph (MDS Analytical Technologies, St. Laurent, QC, Canada) tools were used to individually outline nuclear, cell, and bud cross-sectional areas.

For Cells in Figures 3C and 6.

Each cell field was imaged as a small z-series, with five steps separated by 0.4 μm each. Sec63 CFP signal delineated the nuclear and cell envelopes. For each nucleus and cell, the largest cross-sectional area was determined from the z-series in Photoshop (Adobe Systems, San Jose, CA) and the cells and nuclei were converted to two separate binary masks that were analyzed in ImageJ (http://rsb.info.nih.gov/ij/) using the “Particles 8 Plus” plugin (http://rsb.info.nih.gov/ij/plugins/index.html) in the Morphology package developed by Gabriel Landini (http://rsb.info.nih.gov/ij/plugins/index.html).

For Cells in Figures 1 –3 and 6.

All cells in a field were quantified unless they were undergoing anaphase or cytokinesis, that is, if they possessed an elongated nucleus or two separated nuclei. For all experiments, multiple cell fields were imaged. The resulting data were analyzed in Microsoft Excel (Redmond, CA) and in Matlab (MathWorks, Natick, MA). For volume estimates, it was assumed that nuclei and G1 cells were spherical and that measured areas were cross-sections through the centers of these spheres.

NLS GFP Reporter.

Wild-type yeast (N-419) carrying the plasmid pMGGLA (ARS/CEN, LEU2, MET3pr-GFP-NLS-A) were cultured in synthetic -Met-Leu-Trp 3% ethanol medium. pMGGLA has been described previously (Edgington and Futcher, 2001). To enrich for small cells, the culture was elutriated, and 12 fractions of incrementally larger cells were obtained and kept on ice. Cells in fractions 1, 3, 4, and 10 were mounted. Slides were prepared with a small amount of molten agar mixed with minimal medium lacking a carbon source in microwells. Cells, 1 μl, were spotted onto the cooled, solidified medium, and a coverslip was applied. The coverslip edges were sealed with nail polish, the cells were examined with a microscope (Olympus) and photographed with a 1.3 megapixel Axiocam camera (Zeiss, Thornwood, NY), and morphometry was executed with Openlab software v.2 (Improvision, Lexington, MA). The perimeter of the nucleus was delineated by the edge of the green fluorescent protein (GFP) fluorescent signal, and the cell edge was obtained from DIC images.

Microscopie electronică

To generate a range of cell sizes, cells were collected from three different sources. All cells were in the W303 genetic background, whereas in the prior two approaches, all strains were from the S288c background. To measure small G1-phase cells, unbudded cells from a log phase, YEP 3% ethanol wild-type W303 culture were obtained by elutriation. Fifty-seven cell fields were analyzed by electron microscopy (EM) from these ethanol fractions. To measure moderately sized G1-phase cells, unbudded cells from a log phase, YEP 2% glucose wild-type W303 culture were obtained by elutriation. Twelve cell fields were analyzed by EM from these glucose fractions. To measure large G1-phase cells, conditional G1-cyclin depletion was performed by first propagating BS100 (cln1::LEU2-GAL-CLN1-HA3 cln2Δ::TRP1 cln3Δ::HIS3) to log phase in YEP 1% raffinose, 1% galactose. Cells were pelleted, washed twice in YEP without sugar, and then resuspended in YEP 2% glucose for 5 h. From these experiments, 16 BS100 cell fields were analyzed by EM. All samples were processed and photographed by Tamara Howard, a technician in Dr. David Spector's laboratory, Cold Spring Harbor Laboratory. Photomicrographs were scanned and analyzed using Image Reader 1.0 software from FujiFilm Science Lab for Windows (Stamford, CT). In each field of 30–50 cells, the cell with the largest cross-sectional nuclear area was chosen for further analysis, compensating for the fact that most sections were not taken through the center of the nucleus. It should be noted that our fluorescent studies indicate that there is not a strong relationship between nuclear size variability and cell size, so this method should not generate artifactual correlations between nuclear and cell size for that reason. For the chosen cell, nuclear and cell cross-sectional areas were measured.


Difference Between Gram Positive and Gram Negative Bacteria

Christian Gram, a Danish Physician in 1884 developed a staining technique to distinguish two types of bacteria. The two categories of bacteria based on gram staining are Gram pozitiv bacterii și Gram negative bacterii. Bacteria are first stained with crystal violet or gentian violet. All bacterial cells will stain blue or purple colour with crystal violet solution. Then the bacterial cells are treated with iodine solution (Lugol’s iodine) solution and washed with alcohol (de-staining solution). Those bacteria which retain the blue or purple colour of crystal violet are called Gram positive bacteria and those bacteria which loose the colour of crystal violet after washing with de-staining solution is called Gram Negative bacteria.

Gram negative bacteria are later stained with safranin or fuchsin for observation under microscope. Gram negative bacteria after safranin or fuchsin staining will appear red or pink colour. Gram staining differentiates bacteria by the chemical and physical properties of their cell walls by detecting the properties of peptidoglycan. Gram staining method is useful in differentiating majority of bacterial species into two broad categories. Even though all bacterial species cannot be differentiated based on gram staining technique, this method has immense application in clinical diagnostics and biological researches.

Similarities between Gram Positive and Gram Negative Bacteria

Ø Both are bacterial cells

Ø Both groups are prokaryotic

Ø Both lack membrane bounded organelles

Ø Both groups have covalently closed circular DNA as the genetic material

Ø Both groups contain extra-chromosomal genetic materials (plasmids)

Gram Positive (blue) and Gram Negative (Pink) Bacteria (source wikipedia)

Ø Both groups possess capsule

Ø In both groups, cell wall is made up of peptidoglycan

Ø In both groups, cytoplasm is surrounded by lipid bilayer with many membrane spanning proteins

Ø Both gram-positive and gram-negative bacteria commonly have a surface layer called an S-layer

Ø Both groups of bacteria undergo genetic recombination through transformation, transduction and conjugation

Ø Both groups undergo binary fission as a mode of asexual reproduction

Ø Both groups contain many flagellated and non-flagellated species

Ø Both gram positive and gram negative bacteria are inhibited by antibiotics (their sensitivity varies)

Ø Both groups includes flagellated (motile) and non-flagellated (non-motile) forms

Learn more…

Difference between Gram Positive Bacteria and Gram Negative Bacteria


BIOL 2520 Course-Syllabus-2018

Date Lecture Topic Recommended reading Alberts, 4th ed. Karp, 7th ed. Sept 5 1A Course Plan Sept. 7 1B Introduction to cells 1- 12 1- 13 Sept 10 2 Macromolecules 50-79 40- Sept. 12 3 Cell Cycle 603- 613 573- 581 Sept. 14 4 Mitosis + cytokinesis 618- 633 581- 603 Sept. 17 5 Nucleus structure 232-236, 495-497 488- 493 Sept. 19 6 DNA packaging 185- 193 493- 501 Sept 21 7 Chromosome structure 179- 185 501- 512 Sept. 24 8 Transcription 262- 280 512- 532 Sept. 26 No lecture Sept. 28 9 mRNA 224- 242 435- 455 Oct. 1 10 tRNAs, rRNAs, translation 224- 253 435- 477 Oct. 3 11 Non-coding RNAs 282- 285 455- 461 Oct. 5 12 Endomembrane system 487- 492 270- 288 Oct. 8 - Thanksgiving – no classes - - Oct. 10 - Midterm Exam 1 - - Oct. 12 13 ER proteins &amp lipids 498- 502 290- 300 Oct. 15 14 Golgi &amp vesicular traffic 503- 515 300- 303 Oct. 17 15 Lysosomes, endosomes 515- 522 303- 315 Oct. 19 16 Plasma membrane 359- 381 121- 140 Oct. 21 17 Membrane transport - I 383- 389 147- 156 Oct. 24 18 Membrane transport - II 389- 401 156- 163 Oct. 26 19 Cell signaling - I 526- 538 618- 625 Oct. 29 20 Cell signaling - II 539- 551 634- 636 Oct. 31 21 Cell signaling - III 551- 563 636- 655 Nov. 2 22 Cell energetics I 447- 469 198- 206 Nov. 5 23 Cell energetics II 469- 483 211- 232 Nov. 7 No class – study! - - Nov. 9 - Midterm Exam 2 - - Nov. 12 - Remembrance Day – no class - - Nov. 14 Fall break – no class - - Nov. 16 Fall break – no class - - Nov. 19 24 Cytoskeleton – I 565- 583 324- 353 Nov. 21 25 Cytoskeleton – II 583- 599 354- 364

Nov. 23 26 Cytoskeleton - III 583- 599 356- 364 Nov. 26 27 Cell interactions - I 683- 694 235- 269 Nov. 28 28 Cell interactions - II 694- 702 250- 269 Nov. 30 29 Cancer 712- 725 664- 698 Dec. 3 30 Apoptosis 633- 639 656- 660 Dec. 5 31 Review


Priveste filmarea: Cromozomii - elementele purtătoare ale informaţiei genetice (Decembrie 2021).