Informație

Ce material umple fanta sinaptică? Este apă?


Fisura sinaptică este decalajul dintre neuronii pre-sinaptici și post-sinaptici, iar neurotransmițătorii sunt transferați între neuronii din această regiune. Ce substanță iese în acest spațiu, este apă? Dacă da, ce forță îi face pe neurotransmițători să se deplaseze către receptori, în ciuda ciocnirii cu moleculele de apă?


Există două tipuri de sinapse și anume Sinapsă electrică și Sinapsă chimică. În sinapsa electrică există un contact fizic între două celule prin joncțiuni gap. În sinapsa chimică există un mic decalaj între două celule, denumit astfel fanta sinaptică.

Membranele presinaptice și postsinaptice la sinapsele chimice sunt separate printr-o despicătură sinaptică care are o lățime de 20-50 nm, de 10 ori lățimea separării la joncțiunile gap. Fanta este umplută cu o matrice de proteină extracelulară fibroasă. O funcție a acestei matrice este de a servi drept „lipici” care leagă membranele pre- și postsinaptice.(referință 1)

Aceeași referință afirmă, de asemenea Apa este ingredientul principal atât al fluidului din interiorul neuronului, al fluidului intracelular sau al citosolului, cât și al fluidului exterior care scaldă neuronul, fluidul extracelular. Atomii încărcați electric, ionii care sunt dizolvați în această apă sunt responsabili pentru potențialul de odihnă și acțiune.

Mențiuni de referință 2, Fisura sinaptică nu este pur și simplu un spațiu gol, ci este locul proteinelor extracelulare care influențează difuzia, legarea și degradarea moleculelor, inclusiv neurotransmițători și alți factori, secretați de terminalul presinaptic.

Dacă ne gândim în această direcție, desigur, menținerea împreună a doi neuroni în poziția sinapsă este importantă. Mai mult, este necesară prezența mai multor ioni dizolvați (în apă). Dacă vă amintiți, pentru eliberarea neurotransmițătorilor în fanta sinaptică, este esențial afluxul de ioni Ca2 + prin canalele ionice cu tensiune închisă. Astfel, din toate punctele de mai sus putem concluziona că, fluidul extracelular din fanta sinaptică este în principal apos în compoziția sa cu mai mulți ioni, neurotransmițători eliberați și mai multe proteine ​​care constituie o matrice.

Ce forță îi face pe neurotransmițători să se deplaseze către receptori?

Un rol esențial al astrocitelor este reglarea conținutului chimic al acestui spațiu extracelular. De exemplu, astrocitele învelesc joncțiuni sinaptice în creier, restricționând astfel răspândirea moleculelor de neurotransmițător care au fost eliberate.(referința 1). Astfel, ajută la limitarea neurotransmițătorilor în regiunea mică, crescând astfel probabilitatea de a intra în contact cu receptorul țintă. De asemenea, așa cum se spune în referința 2, există mai multe proteine ​​prezente în fanta sinaptică care influențează difuzia. Înseamnă că mișcarea neurotransmițătorului este prin difuzie și diferiți factori menționați mai sus pot influența mișcarea lor către receptor în mod eficient.

Referințe:

  1. Bear et.al, Neuroscience, exploring the brain, 2015
  2. Neuroștiință, manual de Dale Purves.

Componentele fluidului inter-stitial vor depinde de locul în care se află sinapsa, deși da, vor fi apoase. O bună difuzie de modă veche pe un gradient de concentrație va fi responsabilă pentru asigurarea unui neurotransmițător suficient care ajunge la receptorii de pe cealaltă parte a fantei sinaptice. Greu să găsești ceva pe care îl poți consulta cu ușurință online pentru tine în mod independent, pentru a-mi verifica răspunsul. Aș spune că vor exista capitole întregi despre acest lucru în orice manual de bază de farmacologie. Farmacologia de Rang și Dale este cea mai ușor de găsit într-o bibliotecă universitară și poate fi citită fără multe cunoștințe de biologie.


Tomografie cu crio-electroni și transmisie sinaptică în creier

Creierul este de departe cea mai complexă și una dintre cele mai eficiente structuri biologice cunoscute de om. Un creier uman este format din aproximativ 86 de miliarde de celule nervoase foarte interconectate sau neuroni. Capacitatea organismelor superioare de a răspunde rapid la stimuli externi, de a crea instrumente și comportament organizat pentru supraviețuire, precum și, la oameni, de a sprijini gândirea abstractă și conștiința este crucial legată de capacitatea neuronilor de a schimba informații și de a crea scurte sau lungi - căi termice pentru transferul său între diferite zone ale creierului. Spre deosebire de dispozitivele artificiale, cum ar fi computerele, în care informațiile sunt create și manipulate sub formă de curenți electrici care curg în circuitele electronice strâns conectate, neuronii din creier își păstrează individualitatea ca celule și comunică mai mult între ei prin schimbul de specii chimice, cunoscute ca neurotransmițători. De-a lungul a sute de milioane de ani de evoluție, procesul prin care neurotransmițătorii sunt schimbați între neuroni a fost optimizat la un nivel incredibil de eficiență și fiabilitate. Cu toate acestea, abia recent am reușit să obținem o oarecare perspectivă asupra mecanismelor biochimice complexe care reglementează acest proces.

Neuronii comunică între ei prin transmiterea neurotransmițătorilor prin intermediul punctelor de contact, așa-numitele sinapse neuronale. Designua / Shutterstock.com

Modul în care neuronii schimbă informații
Neuronii au o morfologie foarte caracteristică în comparație cu alte celule și se caracterizează printr-o structură lungă și subțire, numită axon, care iese din corpul celulei și se termină sub forma unui grup ramificat de ramuri care conțin terminale presinaptice. Sinapsele neuronale sunt puncte de contact între neuroni, unde informațiile sunt transferate de la o celulă presinaptică la o celulă postsinaptică. Într-un neuron excitat, sosirea unui semnal electric din corpul celulei în sinapse poate provoca fuziunea unor mici vezicule umplute cu molecule de neurotransmițător cu membrana sinaptică și eliberează conținutul acestuia în spațiul extracelular dintre cei doi neuroni, cunoscut sub numele de fanta sinaptică. . Legarea neurotransmițătorului de receptorul postsinaptic declanșează procese chimice care duc la crearea de semnale electrice în neuronii postsinaptici, completând astfel transferul de informații.

Transferul de informații între neuronii individuali din creier are loc printr-o eliberare atent reglementată de substanțe chimice
neurotransmițători.

Eliberarea neurotransmițătorului este un proces foarte rapid și complex, care necesită o coordonare spațio-temporală precisă a proceselor biochimice care implică proteine ​​presinaptice. Nu orice veziculă sinaptică poate fi eliberată: alte procese biochimice sunt implicate în amorsarea unor vezicule pentru eliberare, pentru a forma așa-numitul bazin ușor eliberabil. Aceste procese sunt efectuate în mare parte de complexe de proteine ​​macromoleculare, care, în multe cazuri, există sub formă tranzitorie și supraviețuiesc doar pentru timpul necesar pentru ca acestea să își exercite funcția.

În crio-EM, probele sunt răcite atât de repede încât moleculele de apă nu au timp să se transforme într-o stare cristalină. PolakPhoto / Shutterstock.com

Eliberarea neurotransmițătorului imagistic
Microscopia electronică (EM) poate fi utilizată pentru a imagina probe biologice, similar microscopiei optice convenționale. În EM, utilizarea unui fascicul de electroni, mai degrabă decât a luminii vizibile, face posibilă atingerea unui nivel de rezoluție mult mai mare decât microscopia standard. Cu toate acestea, în timpul observării EM, probele trebuie păstrate în vid. Aceasta este o problemă majoră în cazul sistemelor biologice, deoarece apa, care constituie o componentă mare a probei, se evaporă în vid, ducând la deteriorarea ireparabilă a probei. Fixarea chimică urmată de deshidratare controlată poate fi utilizată pentru a rezolva parțial această problemă, ceea ce face EM adecvat în studiul structurii și funcției organelor celulare. Cu toate acestea, această tehnică provoacă în continuare modificări ale eșantionului care împiedică studiul proceselor celulare la nivel molecular.

Tomografie crio-electronică
În crio-EM, probele sunt răcite atât de repede încât moleculele de apă nu au suficient timp pentru a se reorienta și a forma cristale de gheață, ceea ce le aduce la o formă solidă asemănătoare sticlei, numită stare vitroasă. Dr. Vladan Lučić de la Institutul de Biochimie Max Planck este expert în utilizarea cri-EM în combinație cu tomografie, o metodă în care mai multe imagini ale unui eșantion cu orientări diferite sunt combinate pentru a forma o imagine tridimensională (tomogramă). Această abordare produce imagini tridimensionale de înaltă rezoluție, de probe celulare complet hidratate, vitrificate, conservate în mediul și starea lor nativă. Folosind această metodă, Dr. Lučić și colaboratorii săi au reușit pentru prima dată să imagineze complexe proteice și vezicule, atât la capetele sinaptice, gata să elibereze neurotransmițători, cât și în procesul de a fi transportate de-a lungul unui axon. Acesta este un rezultat important, deoarece confirmă faptul că veziculele și complexele proteice implicate în eliberările neurotransmițătorilor sunt susceptibile de a fi sintetizate în corpul celulei și apoi transportate prin axon la sinapse și oferă o vedere simultană atât a încărcătura de proteine ​​și membranele lipidice implicate în transport.

Vezicule sinaptice și activitate neuronală
Experimentele de tomografie crio-electronică efectuate pe sinapse izolate biochimic din creierul rozătoarelor arată că, în zona activă, care este o zonă sinaptică în care neurotransmițătorii sunt gata să fie eliberați, veziculele sinaptice sunt ținute legate de membrana sinaptică de diferite tipuri de filamente. , care, împreună cu filamente care leagă veziculele, acționează ca elemente structurale principale care organizează veziculele. Pentru a înțelege funcția și rolul acestor filamente în procesul de eliberare a neurotransmițătorului, Dr. Lučić și colaboratorii săi au dezvoltat proceduri software automatizate care fac posibilă analiza morfologiei, localizării precise și a corelației acestor complexe la sinapsele imaginate în diferite stări relevante pentru eliberare. . Ei au descoperit că aceste filamente sunt structuri dinamice care răspund la stimularea sinaptică și reglează gruparea veziculelor sinaptice prin limitarea dispersiei veziculelor în repaus și permiterea veziculelor să se mobilizeze pentru eliberare în timpul activității sinaptice.

Tomografia crio-electronică are potențialul de a oferi o imagine moleculară detaliată a mecanismului de eliberare a neurotransmițătorului la
membrane sinaptice.

Pe baza acestor constatări, Dr. Lučić a propus un model structural de eliberare a neurotransmițătorului, în care veziculele sinaptice sunt inițial legate de membrana sinaptică prin intermediul unor legături lungi și pot dobândi mai multe legături mai scurte în etapele ulterioare. Această modificare a organizării lor structurale face ca veziculele să fie pregătite pentru eliberarea neurotransmițătorilor în fanta sinaptică.

Vedere tridimensională a unei sinapse: A indică zona analizată. B prezintă segmentarea 3D a veziculelor sinaptice (galbene), conectorilor veziculelor sinaptice (roșu) și teterelor veziculelor sinaptice (albastru). C și D prezintă un conector de veziculă sinaptică (C) și un tether (D). Copright © 2010 Fernández-Busnadiego și colab.

Către un model molecular de eliberare a neurotransmițătorului
În ciuda nivelului fără precedent de înțelegere a mecanismului activității sinaptice, posibil prin tomografie crio-electronică, o serie de probleme tehnice împiedică aplicarea acestei metode pentru a dezlega pe deplin complexitatea amorsării veziculelor și a eliberării neurotransmițătorilor pe membranele sinaptice. Unul dintre avantajele intrinseci ale tomografiei crio-electronice este că toate componentele unei probe date sunt reprezentate în același timp. Prin contrast, microscopia optică poate fi utilizată pentru a imagina numai acele specii moleculare care sunt etichetate artificial și au devenit fluorescente. Acest fapt complică enorm identificarea moleculelor și a complexelor acestora în tomografie crio-electronică, cu excepția cazurilor complexelor foarte mari de formă distinctă.

Pentru a aborda această limitare a tomografiei crio-electronice, Dr. Lučić și colaboratorii săi urmăresc în prezent două abordări. Una dintre ele constă în analiza sinapselor în care o proteină este îndepărtată genetic. Aceasta oferă indicii privind identitatea moleculară a structurilor care lipsesc în comparație cu sinapsele nemodificate. A doua abordare se bazează pe dezvoltarea unui software fără șabloane pentru detectarea și clasificarea complexelor legate de membrană în tomografia celulară cu crio-electroni care conține un număr mare de proteine ​​diferite. Unele dintre clasele de proteine ​​obținute cu această metodă sunt suficient de omogene pentru a permite realizarea unei medii utilizând procedurile disponibile.

Această lucrare a condus deja la o identificare provizorie a unor complexe proteice, pe baza structurilor lor medii și a localizării celulare, și este primul pas către aplicarea tomografiei crio-electronice la detectarea directă, localizarea și identificarea complexelor proteice implicate în transmisie sinaptică în mediul lor celular nativ.

ktsdesign / Shutterstock.com

Răspuns personal

În ce domenii, pe lângă înțelegerea noastră fundamentală a funcției creierului, munca ta va avea cel mai mare impact?

În timp ce această lucrare este ghidată de interesul nostru pentru transmiterea sinaptică, metoda pe care am dezvoltat-o ​​este mai generală. Poate fi aplicat și altor ținte celulare în care veziculele joacă un rol proeminent, precum transportul vezicular și sistemul secretor. În plus, ne-am extins deja procedura pentru a analiza complexele moleculare care pun capăt fanta sinaptică, extinzând astfel aplicabilitatea la alte tipuri de joncțiuni celulare, cum ar fi cele proeminente în răspunsul imun și dezvoltare.


E.3a Comportament înnăscut și amplificat

Materiale de lectură: AA-SG 135 și AA-CC 306

Comportament înnăscut: Comportamente care sunt programate genetic și se dezvoltă independent de contextul de mediu. De exemplu, mișcarea de Planaria viermii plati spre mancare este un comportament innascut.

Întrebare bazată pe date: chimiotaxie în păduchi

1. O metodă pentru a încuraja păduchii să se deplaseze din seringă și în unul dintre brațe este de a atrage aer parfumat cu alimente pe unul dintre brațe și de a atrage aer neparfumat pe celălalt braț. Păduchii vor fi atrași de mirosul alimentelor și se vor deplasa de la seringă la braț cu aer parfumat. O altă metodă care testează alte simțuri ale păduchilor este să atragă aer încălzit pe un braț și să tragă aer rece pe celălalt braț.

2. Pentru toate cele trei specii, majoritatea nevertebratelor s-au mutat la braț cu aer parfumat. Numărul nevertebratelor colectate la braț cu aer parfumat este aproape dublu față de numărul nevertebratelor colectate la braț cu aer neparfumat pentru toate cele trei specii. Cu toate acestea, nu toate nevertebratele s-au mutat pe braț cu aer parfumat. Există încă o anumită proporție de nevertebrate care se deplasează către brațul fără parfum.

3. Deoarece păduchii au răspuns parfumului, păduchii trebuie să aibă chemoreceptor, un receptor care simte mirosul prin legarea cu molecule specifice.

4. a. Mulți păduchi au fost atrași de brațul parfumat al aparatului pentru a se reproduce. Pentru a reproduce cu succes descendenții, păduchii trebuie să meargă în locurile în care pot găsi aceeași specie.

b. La fel ca reproducerea, hrănirea este importantă și pentru păduchii. Pentru a reduce concurența pentru mâncare, o parte din păduchi de lemn s-a dus la brațul neparfumat al aparatului. În plus, unii păduchi doresc să-și depună ouăle în locuri sigure, așa că ar fi putut evita brațul parfumat.


6.5 - Nervi, hormoni și homeostazie

The somatic nervos sistemul include neuronii motori atașați la mușchii scheletici și neuronii senzoriali atașați la organele de simțire ale receptorilor.

The sistem nervos autonom include nervii de la receptorii interni și nervii atașați la mușchiul neted.

6.5.2 & # 8211 Desenați și etichetați o diagramă a structurii unui neuron motor

6.5.3 & # 8211 Afirmați că impulsurile nervoase sunt conduse de la receptori către SNC de către neuroni senzoriali, în interiorul SNC de către neuroni de releu și de la SNC la efectori de către neuroni motori

Corpul conține multe diferite receptori care detectează specific stimuli și le transformă într-un impuls nervos. Sistemul nervos central conduce impulsurile nervoase de la nervii senzoriali de-a lungul neuronilor senzoriali. Acest impuls este apoi transmis către neuronii care îl transmit prin creier și coloană vertebrală, apoi către un neuron motor și un efector (cum ar fi mușchii), unde se produce răspunsul.

6.5.4 & # 8211 Definiți potențialul de odihnă și potențialul de acțiune (depolarizare și repolarizare)

Potențial de odihnă - Un potențial electric pe o membrană celulară atunci când nu se efectuează un impuls Potențial de acțiune - Inversarea localizată sau depolarizarea și apoi restaurarea sau

Potențial de acțiune - Inversarea localizată, sau depolarizarea, și apoi restaurarea sau repolarizarea potențialului electric între interiorul și exteriorul unui neuron pe măsură ce impulsul se mișcă de-a lungul acestuia

6.5.5 & # 8211 Explicați cum trece un impuls nervos de-a lungul unui neuron ne-mielinizat

Impulsurile nervoase se mișcă de-a lungul axonului folosind un efect domino, cu un potențial de acțiune care provoacă unul în partea adiacentă. Ionii de sodiu și potasiu se deplasează pe membrana plasmatică prin transport activ pentru a modifica concentrația și a provoca un potențial de acțiune și apoi a reveni la potențialul de odihnă.

Ionii Na + sunt concentrat afară membrana axonului, în timp ce ionii K + sunt concentrat în interior membrana. Canalele de ioni Na + și K + sunt închis. Pentru ca un potențial de acțiune să fie creat, acesta trebuie să se ridice peste un anumit prag înainte de a se crea potențialul de acțiune.

Na + grăbiți-vă înăuntru membrana și K + ion se grăbește afară pentru a inversa concentrațiile. Canalele de ioni Na + se deschid, apoi se închid pe măsură ce se deschid canalele de ioni K +. Interiorul are acum o sarcină netă pozitivă, în timp ce exteriorul are o sarcină netă negativă.

Pompele ionice utilizate pentru a crea potențialul de acțiune trebuie să fie utilizate transport activ pe măsură ce mișcă ionii împotriva gradientului de concentrație. Acest necesită ATP pentru energie. Polarizarea membranei se schimbă în timpul acestui proces de la -70mV la potențial de odihnă pentru + 30mV la potențial de acțiune. Este readus la -70mV când se deschid canalele ionice K +.

După ce neuronul este repolarizat, există o scurtă perioadă în care acea secțiune a axonului nu poate avea un potențial de acțiune, numită Perioada refractară.

The legea totul sau nimic este că un impuls nervos va fi transmis doar dacă atinge pragul de -55mV. Dacă nu, atunci nu va fi creat niciun potențial de acțiune. Dacă da, atunci se va trimite un potențial de acțiune care este aceeași tensiune ca orice alt potențial de acțiune. Pe un grafic, toate potențialele de acțiune arată la fel, fiecare crescând la + 35mV.

6.5.6 & # 8211 Explicați principiile transmiterii sinaptice

The sinapsă este joncțiunea dintre doi neuroni - neuronul presinaptic care transmite semnalul către neuronul postsinaptic. Fanta sinaptică este spațiul umplut cu lichid între un terminal axon și capătul unei dendrite. Sunt locația comunicării dintre neuroni și glande sau mușchi. Acestea transmit semnale electrice sau chimice către celulele țintă. Când un potențial de acțiune ajunge la capătul neuronului, canalele ionice Ca + se deschid pentru a permite ca Ca + să curgă. Această cauză exocitoza unui neurotransmițător la fanta sinaptică.

Neurotransmițătorul difuzează prin fanta sinaptică și apoi se leagă de un receptor post-sinaptic. Membrana post-sinaptică devine polarizată, determinând deschiderea canalelor ionice Na +. Un potențial de acțiune este creat în neuronul post-sinaptic. Membrana post-sinaptică devine apoi depolarizat. Canalele ionice K + se deschid imediat pentru a provoca hiperpolarizare a membranei post-sinaptice.

Un enzimă se leagă de neurotransmițător pentru a-l hidroliza și a preveni funcția viitoare. Este reciclat în corp.

6.5.7 - Afirmați că sistemul endocrin este format din glande care eliberează hormoni care sunt transportați în sânge

Sistemul endocrin este, de asemenea, numit sistemul hormonal. Acest lucru se datorează faptului că este format din glande care eliberează hormoni în celulele noastre pentru a ajuta funcția corporală. Acestea ajută la reglarea dispoziției, creșterii și dezvoltării, funcției țesuturilor, metabolismului, funcției sexuale și proceselor de reproducere. În timp ce sistemul nervos controlează procesele care se întâmplă rapid, cum ar fi respirația și mișcarea, sistemul endocrin controlează procesele mai lente, cum ar fi creșterea celulară.

Hormonii, ca mesageri chimici ai corpului, transferă informații circulând prin fluxul sanguin. Glandele secretă hormoni pentru a fi transportați în altă parte a corpului. Hormonii merg direct de la glande la sânge și pot călători în orice parte a corpului. Cu toate acestea, vor transmite mesaje numai către celule pentru care sunt destinate.

6.5.8 - Afirmați că homeostazia implică menținerea mediului intern între limite, inclusiv pH-ul din sânge, concentrația de dioxid de carbon, concentrația de glucoză din sânge, temperatura corpului și echilibrul apei

Homeostazia controlează variabilele din corpul nostru pentru a menține sănătatea. Rezultatul perturbării se numește stres, care va duce la boli dacă nu este corectat. Aceste variabile includ concentrația de glucoză din sânge, pH-ul din sânge, temperatura corpului, concentrația de CO2 și echilibrul apei. Aceste niveluri sunt menținute la niveluri constante în limite înguste.

6.5.9 - Explicați că homeostazia implică monitorizarea nivelurilor variabilelor și corectarea modificărilor nivelurilor prin mecanisme de feedback negativ

Pentru toate variabilele controlate în homeostazie, există un set point în jurul căruia corpul fluctuează într-un anumit interval. Feedback-ul negativ este folosit pentru a readuce variabila la punctul său stabilit.

Corpul are multe senzori care detectează și semnalizează atunci când variabila fluctuează de la punctul stabilit. Aceste informații sunt transmise către centru de control să direcționeze acțiunea care ar trebui luată pentru a remedia acest lucru. The efectori sunt mecanismul pentru readucerea variabilei la punctul său de setare și se activează sau se opresc sub direcția centrului de control. The raspuns este produs de efector.

Variabilele menținute de homeostazie includ pH-ul din sânge, concentrația de CO2, concentrația de glucoză din sânge, temperatura corpului și echilibrul apei. Feedback-ul negativ se bazează pe sistemele nervoase sau endocrine. Are efectul opus încercării și stabilizării variabilei înapoi la punctul stabilit. Cu toate acestea, feedback-ul negativ este declanșat numai atunci când există o abatere semnificativă față de punctul stabilit.

6.5.10 - Explicați controlul temperaturii corpului, inclusiv transferul de căldură în sânge, și rolurile hipotalamusului, glandelor sudoripare, arteriolelor cutanate și frisoanelor

The hipotalamus, localizat în creier, iar cortexul cerebral mențin homeostazia. Hipotalamusul trimite semnale către glanda pituitară sub formă de hormoni. Glanda pituitară secretă apoi hormonul stimulator în sânge către glanda țintă, care la rândul său îi secretă hormonii. Hipotalamusul și glanda pituitară pot regla nivelul hormonilor din sânge. Procesul utilizat pentru reglarea temperaturii se numește feedback negativ.

La om, punctul de referință pentru temperatura corpului este de 37 ° C. Corpul detectează dacă corpul trece deasupra sau sub acesta folosind senzori precum hipotalamusul, receptorii pentru căldura pielii și receptorii pentru frigul pielii.

Răspuns sub punctul stabilit:

Dacă temperatura este mai mică de 37 ° C, sistemul nervos simpatic are un răspuns involuntar:

  • vasoconstricție la scăderea fluxului sanguin la piele pentru a reduce pierderile de căldură
  • metabolism crescut pentru a crește producția de căldură
  • tremurând pentru a crește producția de căldură
  • piloerecție sau piele de gaina, pentru a reduce pierderile de căldură

În plus, cortexul cerebral direcționează următoarele răspunsuri voluntare:

  • odihnă pentru a reduce pierderile de căldură
  • răspunsuri comportamentale precum îmbrăcăminte mai caldă, activitate musculară, băutură caldă, curling și mâncare

Efectorii vor crește producția de căldură și vor reduce pierderile de căldură până când temperatura este la 37 ° C.

Răspuns deasupra punctului de setare:

Dacă temperatura este mai mare de 37 ° C, sistemul nervos simpatic are un răspuns involuntar pentru a încerca o creștere a pierderii de căldură:

  • scăderea metabolismului pentru a scădea producția de căldură
  • transpiraţie pentru a crește pierderea de căldură
  • letargie pentru a scădea producția de căldură
  • piele arteriolele cresc în diametru pentru a crește pierderea de căldură
  • mușchii scheletici relaxați pentru a reduce producția de căldură

Corpurile noastre au, de asemenea, unele răspunsuri voluntare controlate de cortexul cerebral:

  • odihnă pentru a scădea producția de căldură
  • răspunsuri comportamentale cum ar fi băuturi reci, îmbrăcăminte mai rece și ventilator

Efectorii vor încerca să scadă producția de căldură și să crească pierderile de căldură până când temperatura atinge 37 ° C

6.5.11 - Explicați controlul concentrației de glucoză din sânge, inclusiv rolul glucagonului, insulinei și celulelor a și b în insulele pancreatice

Concentrația glicemiei fluctuează pe parcursul zilei, de obicei de la aproximativ 4 la 8 milimoli dm-3. Folosind feedback negativ, organismul poate modifica rata la care glucoza este preluată în sânge. Punctul de referință pentru concentrațiile de glucoză din sânge este de aproximativ 90 mg / 100 ml. Centrul de control pentru aceasta este insulele pancreatice.

Celulele beta din insulele pancreatice produc insulină, substanța chimică care stimulează absorbția glucozei din sânge pentru conversia în glicogen sau pentru respirație. Aceasta scade concentrația de glucoză din sânge.

Insulina se leagă de receptorii de pe mușchi și celulele hepatice pentru a permite glucozei să se deplaseze din sânge în celule. Glucoza este fie metabolizată, fie stocată. Aceasta continuă până când concentrația este la punctul stabilit.

Celulele alfa din insulele pancreatice produc glucagonul chimic, stimulând celulele ficatului să transforme glicogenul în glucoză. Ca urmare, concentrația de glucoză din sânge crește.

Glucagonul se leagă de receptorii celulelor hepatice pentru a activa enzime care descompun glicogenul în glucoză. Glucoza se deplasează în sânge până când concentrația este la punctul stabilit.

6.5.12 - Distingeți între diabetul de tip I și tipul II

Persoanele cu diabet zaharat au niveluri de glicemie prea mari. Glucoza nu este capabilă să ajungă din sânge la celule pentru a furniza energie.


Discuţie

Sinapsele excitatorii ale SNC sunt centrale pentru funcțiile cerebrale, dar structura lor nu este încă bine cunoscută. Fanta lor este cel mai adesea privită ca un spațiu extracelular apos nestructurat. Multe observații au arătat că realitatea este destul de diferită, dar nu s-a ajuns încă la un consens cu privire la structura diferitelor elemente sinaptice. În fisură, s-a observat o placă centrală densă, fibrile paralele cu membranele și fibre transsinaptice dezorganizate sau aranjate periodic, în funcție de condițiile de pregătire (2, 9-11).

În studiul nostru, sinapsele se află într-o stare mai bună de conservare: am vitrificat felii de hipocampe organotipice vii de la șobolani și le-am observat hidratate și necolorate. Agregarea moleculară este minimizată, iar densitatea optică observată a imaginii se corelează direct cu densitatea materiei din specimen (7). În mod ideal, țesutul nervos ar trebui să fie criofixat fără nici un crioprotector, așa cum sa făcut pentru cartilaj și piele (26-28, 33). Din păcate, acest proces nu a fost încă posibil. Cu toate acestea, am arătat prin microscopie electronică convențională că structura sinapselor nu este vizibil afectată de o scurtă incubație în 20% dextran osmotic neactiv, suplimentat cu cantitatea minimă de 5% zaharoză. Mai mult, înregistrările activității sinaptice evocate nu prezintă modificări de durată după tratamentul cu crioprotector, demonstrând că feliile de hipocampal organotipice rămân vii și sinapsele rămân funcționale. De asemenea, trebuie să ținem cont de faptul că, chiar dacă vitrificarea este ordinele de mărime mai rapide decât fixarea chimică, este nevoie de 10 ms pentru a imobiliza proba (27). Această durată nu este neglijabilă în comparație cu evenimentele sinaptice. Mai mult, aplicarea bruscă a presiunii ridicate poate influența structurile sinaptice.

Sinapsele excitatorii și inhibitorii diferă în mai multe aspecte în special, primele sunt mai mari decât cele din urmă (2). Pe baza acestui criteriu, toate sinapsele prezentate în prezentul studiu sunt probabil de tip excitator. Cea mai frapantă caracteristică pe care am observat-o este organizarea periodică de 8,2 nm a complexelor despicate. Așa cum era de așteptat, este observat doar într-o minoritate a sinapselor, deoarece trebuie să aibă orientarea corectă, dar observația noastră este compatibilă cu prezența sa în fiecare sinapsă. Deoarece micrografiile CEMOVIS sunt realizate prin suprapunerea caracteristicilor de peste 70 nm, este dificil de interpretat organizarea 3D a complexelor periodice. Motivul repetat ar putea fi fie un singur strat, fie mai multe filamente suprapuse. În orice caz, acestea trebuie aranjate în mod regulat. Deși identitatea complexelor nu poate fi afirmată, o serie de date sugerează că acestea ar putea fi făcute dintr-o varietate de molecule de adeziune, care sunt exprimate pe scară largă la sinapsă (3). Din harta atomică a două molecule de adeziune homofilă, N-cadherina (4) și molecula de adeziune a celulelor neuronale (5), a fost ipotezată o organizație cu fermoar care menține membranele presinaptice și postsinaptice aliniate (4, 5). Perioada așteptată este de ~ 7,5 nm pentru N-cadherină și de ~ 8 nm pentru molecula de adeziune a celulelor neuronale. Observațiile noastre sunt compatibile cu acest model. Mai mult, centrul fantei este mai dens, sugerând că moleculele care apar din ambele membrane plasmatice se suprapun pentru a închide fermoarul. Recent, Lucic și colab. (34) au observat sinaptozomi izolați în strat subțire vitrificat. Un model 3D al fantei a fost reconstruit și dezvăluie o rețea moleculară mai complexă și mai conectată. Deteriorarea structurală sau pierderea materialului asociat cu prepararea sinaptozomilor ar putea explica diferența cu observațiile noastre.

Structura desmosomului pielii, o joncțiune celulă-celulă bazată pe cadherină, a fost recent dezvăluită de CEMOVIS (26). Componenta sa extracelulară se caracterizează printr-o structură transversală periodică dreaptă de 5 nm, care apare mai regulată decât complexele de fisuri sinaptice. Această diferență este în concordanță cu diversitatea mai mică a proteinelor desmosomale și cu faptul că sinapsele nu numai că au proprietăți adezive pentru a menține elementele presinaptice și postsinaptice aliniate, dar posedă și funcții mai elaborate și dinamice. În consecință, am putea concepe modificări subtile ale structurii fisurii sinaptice, în raport cu plasticitatea sinaptică. O altă problemă importantă este soarta structurii fisurii organizate în raport cu fuziunea SV cu membrana plasmatică presinaptică. În funcție de modelul luat în considerare (kiss-and-run sau fuziune completă), acest eveniment ar putea genera o mișcare considerabilă de fosfolipide, care trebuie să fie adaptate la structura din fisură.

CEMOVIS face posibilă determinarea densității reale a celor mai mici compartimente celulare. Se relevă că concentrația de material în fisură este mai mare decât în ​​citoplasmă. Această observație face cu siguranță învechită concepția pe scară largă a unei simple prelungiri a spațiului extracelular. În consecință, este posibil ca neurotransmițătorii să nu poată difuza la fel de liber așa cum se credea anterior, iar modelele bazate pe simulare computerizată vor trebui să încorporeze aceste date (35-37). În mod similar, difuzia receptorului neurotransmițător postsinaptic, care este implicată în plasticitatea sinaptică (38), ar putea fi afectată de complexele organizate.

Granulele sau fibrele presinaptice sunt frecvent observate în apropierea SV și a membranei plasmatice. Acestea ar putea face parte din matricea cito-scheletală asamblată în zona activă de eliberare a neurotransmițătorului (39). Pe imaginile 2D, este dificil să caracterizăm aceste structuri mai precis, dar datele noastre demonstrează că aceste structuri există și ridică speranța că tomografia secțiunilor vitroase va permite caracterizarea lor detaliată. În prezent, problemele tehnice încă împiedică utilizarea de rutină a tomografiei secțiunilor vitroase, dar rezultatele încurajatoare au fost deja publicate de Lucic și colab. (34) și Hsieh și colab. (40).

Densitățile postsinaptice pot fi clasificate în două categorii. Primul este reprezentat de o densitate care se estompează pe câteva zeci de nanometri. Acesta corespunde densității postsinaptice descrise cu microscopia electronică convențională (Fig. 3 și 4 referințe 2 și 13). A doua categorie este formată dintr-o foaie groasă de 5 nm (Fig. 5 F și G ). Sunt necesare mai multe investigații pentru a defini natura și rolul acestei fișe. Dosemeci și colab. (41) au arătat că activitatea sinaptică duce la o îngroșare tranzitorie a densității postsinaptice. În consecință, putem specula că cele două forme observate ar putea corespunde cu două stări funcționale diferite. Alternativ, ele ar putea reprezenta două clase distincte de sinapsă.

Dimensiunile mai multor caracteristici par mai mari cu CEMOVIS decât cu microscopia electronică convențională. De exemplu, diametrul mediu al SV este de 37,7 nm în stare hidratată, în timp ce în secțiunile convenționale deshidratate este între 30,4 și 35,2 nm (42, 43). În mod similar, lățimea fisurii sinapselor excitatorii este de ~ 20 nm în secțiunile convenționale (2, 43), în timp ce în criosecții, este de 23,8 nm. Acest rezultat este în concordanță cu fanta de 24,2 nm a sinapselor izolate studiate prin tomografie crio-electronică (34). Dimensiunile obținute cu criometodele ar trebui considerate mai apropiate de realitate, deoarece, spre deosebire de metodele convenționale, nu necesită deshidratare, astfel încât agregarea moleculară și contracția ulterioară să fie reduse la minimum (6, 7, 16).

În viitor, sperăm că îmbunătățirile congelării la presiune înaltă și tehnicile mai fine de biopsie vor face posibilă vitrificarea unor bucăți mici de țesut nervos fără a fi nevoie de niciun crioprotector. Mai mult, tomografia secțiunilor vitroase, asociată cu prelucrarea computerizată a imaginilor, cum ar fi andocarea proteinelor de structuri atomice cunoscute în tomograme, va duce la o hartă moleculară a ciclurilor biochimice sinaptice și a căilor de semnalizare și va prinde complexe tranzitorii care nu ar putea fi dezvăluite de niciunul altă medie (44).


Reclamație DMCA

Dacă credeți că conținutul disponibil prin intermediul site-ului web (așa cum este definit în Termenii și condițiile noastre) încalcă unul sau mai multe drepturi de autor, vă rugăm să ne anunțați furnizând o notificare scrisă („Notificare de încălcare”) care conține informațiile descrise mai jos către persoana desemnată agent listat mai jos. Dacă Tutorii Varsity iau măsuri ca răspuns la o Notificare privind încălcarea dreptului, va face o încercare de bună credință de a contacta partea care a pus la dispoziție un astfel de conținut prin intermediul celei mai recente adrese de e-mail, dacă este cazul, furnizată de către o astfel de parte Tutorilor Varsity.

Notificarea dvs. de încălcare poate fi transmisă părții care a pus la dispoziție conținutul sau unor terțe părți, cum ar fi ChillingEffects.org.

Vă rugăm să rețineți că veți fi răspunzător pentru daune (inclusiv costurile și onorariile avocaților) dacă declarați în mod eronat că un produs sau activitate vă încalcă drepturile de autor. Astfel, dacă nu sunteți sigur că conținutul localizat sau legat de site-ul web vă încalcă drepturile de autor, ar trebui să luați în considerare mai întâi contactarea unui avocat.

Urmați acești pași pentru a depune o notificare:

Trebuie să includeți următoarele:

O semnătură fizică sau electronică a proprietarului dreptului de autor sau a unei persoane autorizate să acționeze în numele său. detalii pentru a permite Tutorilor Varsity să găsească și să identifice în mod pozitiv acel conținut, de exemplu, avem nevoie de un link către întrebarea specifică (nu doar numele întrebării) care conține conținutul și o descriere a porțiunii specifice a întrebării - o imagine, o link, text, etc - reclamația dvs. se referă la numele dvs., adresa, numărul de telefon și adresa de e-mail și o declarație a dvs.: (a) că credeți cu bună-credință că utilizarea conținutului despre care pretindeți că vă încalcă drepturile de autor este neautorizat prin lege sau de către proprietarul drepturilor de autor sau agentul respectivului proprietar (b) că toate informațiile conținute în notificarea dvs. privind încălcarea dreptului sunt corecte și (c) sub pedeapsa mărturiei mincinoase, că sunteți fie proprietarul drepturilor de autor sau o persoană autorizată să acționeze în numele lor.

Trimiteți reclamația agentului nostru desemnat la:

Charles Cohn Varsity Tutors LLC
101 S. Hanley Rd, Suite 300
Louis, MO 63105


Partea 2: Reciclarea veziculelor sinaptice: endocitoză ultrarapidă

00: 00: 0722 Bună ziua. Sunt Erik Jorgensen de la Universitatea din Utah.
00: 00: 1112 Bine ați venit la partea 2 a reciclării veziculelor sinaptice.
00: 00: 1604 Și așa, despre ce aș vrea să vă spun astăzi este despre
00: 00: 1803 descoperirea endocitozei ultrarapide.
00: 00: 2100 Deci, în ultimul videoclip,
00: 00: 2308 am vorbit despre descoperirea lui
00: 00: 2509 exocitoza veziculei sinaptice,
00: 00: 2801 care fusese propus de Bernard Katz,
00: 00: 2909 și apoi a fost dovedit cu adevărat
00: 00: 3024 prin opera lui Heuser și Reese,
00: 00: 3224 folosind microscopia electronică.
00: 00: 3511 Și apoi John Heuser și Tom Reese
00: 00: 3707 au continuat aceste experimente
00: 00: 3817 și am descoperit că există
00: 00: 4214 reciclarea veziculelor sinaptice prin endocitoză la sinapsă.
00: 00: 4514 Și concluziile la care au ajuns au fost că
00: 00: 4811 acesta este un proces mediat de clatrin
00: 00: 4924 și a durat aproximativ 30 de secunde,
00: 00: 5120 deci a fost un proces relativ lent.
00: 00: 5407 Dar imaginile erau frumoase
00: 00: 5522 și este fără îndoială că acest lucru
00: 00: 5901 apare la sinapse.
00: 01: 0010 ceea ce aș vrea să vă spun astăzi,
00: 01: 0121 în partea a doua,
00: 01: 0308 este că există un alt mecanism
00: 01: 0515 care acționează la sinapse,
00: 01: 0715 și că acesta acționează într-un interval de timp foarte rapid,
00: 01: 1005 între 30-50 milisecunde,
00: 01: 1207 deci de aproximativ 1000 de ori mai rapid
00: 01: 1410 decât ceea ce s-a văzut prin endocitoză mediată de clatrin.
00: 01: 1711 Și așa vă voi spune despre
00: 01: 2005 experimentele noastre la viermi și la șoareci,
00: 01: 2122 și apoi, la sfârșit,
00: 01: 2308 Voi reconcilia munca lui Heuser și Reese
00: 01: 2521 cu endocitoză ultrarapidă.
00: 01: 2813 Deci, am ales să facem
00: 01: 3200 fac studiile noastre într-un nematod,
00: 01: 3322 un mic vierme rotund, numit C. elegans.
00: 01: 3604 Și avantajul este că
00: 01: 3800 sunt mulți mutanți disponibili,
00: 01: 3913, astfel încât să puteți studia procesele
00: 01: 4102 și provoacă defecte în ele,
00: 01: 4214 și vezi cum funcționează mecanismele moleculare
00: 01: 4410 lucrează la reciclarea veziculelor sinaptice,
00: 01: 4722 dar ce este important pentru experimente
00: 01: 4913 Vă povestesc astăzi
00: 01: 5024 este că nematodul este transparent.
00: 01: 5303 deci, tu. o lumină.
00: 01: 5519 este perfect transparent la lumină,
00: 01: 5716 și deci este important pentru că
00: 01: 5914 vom folosi stimularea optogenetică
00: 02: 0110 a sistemului nervos.
00: 02: 0223 Așa că ne întoarcem la locul crimei.
00: 02: 0525 am vorbit despre unele dintre aceste experimente
00: 02: 0725 de la Heuser și Reese
00: 02: 0905 se făcuse la Laboratorul biologic marin
00: 02: 1108 în Woods Hole,
00: 02: 1318 în 1973. începând cu 1973,
00: 02: 1506 și experimentele despre care vă voi povesti
00: 02: 1711 a început în 2008
00: 02: 1903 din munca noastră, Shigeki Watanabe
00: 02: 2208 și munca mea la MBL.
00: 02: 2603 Deci, ceea ce am vrut să facem a fost să stimulăm,
00: 02: 2726, dar nu am vrut să folosim stimularea electrică
00: 02: 2911 pentru că am vrut să facem acest lucru într-un animal întreg,
00: 02: 3110 la un animal care nu a fost disecat
00: 02: 3405 și nu a trebuit să îndepărtăm nervii
00: 02: 3522 și atașați-le la fire stimulatoare.
00: 02: 3719 Deci, modalitatea de a face acest lucru este să folosești
00: 02: 3922 canale ionice activate de lumină.
00: 02: 4127 Deci, există această algă unicelulară
00: 02: 4418 numit Chlamydomonas
00: 02: 4523 și are fototaxie,
00: 02: 4800 adică înoată spre o sursă de lumină.
00: 02: 4919 Și motivul pentru care poate face acest lucru este
00: 02: 5210 are un canal ionic activat de lumină,
00: 02: 5320, astfel încât să-l luminați cu lumină
00: 02: 5526 și care deschide un canal de ioni
00: 02: 5719 și asta, pentru că este ADN
00: 03: 0008 și codul este universal,
00: 03: 0112 putem tăia ADN-ul din Chlamydomonas
00: 03: 0514 și pune-l într-un nematod.
00: 03: 0704 Și așa se arată aici.
00: 03: 0816 Deci, ceea ce am făcut este că avem
00: 03: 1015 introduce canalrodopsină în
00: 03: 1218 neuroni motori ai acetilcolinei
00: 03: 1414 care conduc contracția mușchilor,
00: 03: 1621 și așa avem aici. se afișează canalul rodopsină,
00: 03: 2005 și iată un neuron colinergic
00: 03: 2202 care exprimă rodopsină.
00: 03: 2425 Deci, acum, ce putem face este
00: 03: 2626 ne putem lipi de un mușchi
00: 03: 2829 și înregistrați activitatea mușchiului.
00: 03: 3107 Asta înseamnă că înregistrăm
00: 03: 3326 activitate postsinaptică
00: 03: 3509 care vine de la neuronul motor.
00: 03: 3624 Deci, de fiecare dată când neurotransmițătorul este eliberat,
00: 03: 3817 care va provoca o depolarizare
00: 03: 4123 sau un curent în acești mușchi.
00: 03: 4500 Deci, acum ce putem face este să aprindem o lumină,
00: 03: 4800 și când acea lumină activează acel neuron motor,
00: 03: 4929 apoi vedem [neurotransmițători]
00: 03: 5216 fiind eliberat aici la sinapsă,
00: 03: 5229 și apoi putem înregistra acea activitate
00: 03: 5513 folosind această pipetă de patch-uri.
00: 03: 5702 Și acele rezultate sunt afișate aici.
00: 03: 5903 Și acest lucru este foarte frumos,
00: 04: 0110 pentru că atunci când foloseam stimularea electrică
00: 04: 0301 pe preparatele disecate,
00: 04: 0407 am descoperit că neuronii au murit adesea,
00: 04: 0622 dar ei pot răspunde
00: 04: 0826 trenuri foarte robuste de stimuli ușori.
00: 04: 1017 Deci, aici, folosim
00: 04: 1214 un tren de 30 de secunde cu stimul de lumină de 10 Hz,
00: 04: 1511 și puteți vedea că celula răspunde
00: 04: 1819 destul de bine la asta
00: 04: 2009 - asta înseamnă că neuronul motor eliberează neurotransmițătorul
00: 04: 2211 de fiecare dată când vede un impuls luminos.
00: 04: 2606 Deci, este minunat,
00: 04: 2800 putem stimula un animal întreg
00: 04: 3006 și eliberați neurotransmițătorul,
00: 04: 3206 dar cum vom captura acel eveniment?
00: 04: 3506 Și astfel împrumutăm o pagină
00: 04: 3723 de la Heuser și Reese,
00: 04: 3907 și o să înghețăm proba
00: 04: 4103 cât de repede putem
00: 04: 4226 după ce a fost inițiată o transmisie sinaptică,
00: 04: 4607 și din acest motiv un congelator de înaltă presiune.
00: 04: 4719 Și acestea sunt dispozitive cu adevărat minunate.
00: 04: 5002 Ele merg de la 1 la 2000 de atmosfere în 15 milisecunde,
00: 04: 5408 și ceea ce face asta este asta. molecule de apă,
00: 04: 5720 dacă răcorești ceva încet,
00: 05: 0018 se va rearanja și apoi va forma cristale de gheață,
00: 05: 0224 și acele cristale de gheață vor sparge o celulă
00: 05: 0522 sau vor crea.
00: 05: 0710 vor exclude solutele și sărurile,
00: 05: 1117 și asta va crea regiuni hipertonice,
00: 05: 1321 și astfel apa va curge în acea regiune hipertonică
00: 05: 1612 și, de asemenea, arunca în aer celula.
00: 05: 1902 Deci, în timpul înghețului lent,
00: 05: 2028 sunt multe leziuni tisulare.
00: 05: 2422 Dar dacă ai putea face asta sub presiune atmosferică ridicată,
00: 05: 2800 moleculele de apă nu au timp să se rearanjeze
00: 05: 3025 - sunt lente -
00: 05: 3029 și scazi temperatura,
00: 05: 3601 și moleculele de apă se opresc pur și simplu la locul lor.
00: 05: 3804 Aceasta se numește gheață vitroasă, deoarece nu este organizată în
00: 05: 4000 o formă cristalină.
00: 05: 4300 Deci, ce ne permite să facem asta. deci, trecem de la ambient.
00: 05: 4421 deci, de la temperatura camerei, 22 de grade,
00: 05: 4722 - -50 grade Celsius
00: 05: 4920 în 10 milisecunde,
00: 05: 5029 și asta ne permite
00: 05: 5228 pentru a îngheța până la 200 microni adâncime
00: 05: 5503 fără a se forma cristale de gheață
00: 05: 5628 și fără nici o distrugere a țesutului.
00: 05: 5913 Deci, ceea ce facem după asta este atunci
00: 06: 0207 am pus proba aceea la -90 grade,
00: 06: 0407 la ce ne ținem,
00: 06: 0522 și punem în fixativ, în acetonă.
00: 06: 0726 Și apoi moleculele de apă
00: 06: 0918 ies încet
00: 06: 1023 și sunt schimbate cu acetonă,
00: 06: 1218 și transportul cu acetonă sunt
00: 06: 1618 fixatori, cum ar fi osmiu.
00: 06: 1816 Deci, cum am reușit să funcționeze această stimulare a luminii
00: 06: 2217 este afișat aici.
00: 06: 2323 Deci, în mod normal, este.
00: 06: 2615 prezentat aici în galben, este titularul specimenului,
00: 06: 2818 cupa specimen,
00: 06: 3004 și astfel viermii noștri vor fi ținuți în acest mic loc de aici.
00: 06: 3301 Și presiunea vine de la acest piston,
00: 06: 3616 chiar aici,
00: 06: 3808 care trântește proba
00: 06: 4009 împotriva unei nicovală de diamant negru,
00: 06: 4126 și așa creăm presiune.
00: 06: 4326 Dar, în aceste condiții
00: 06: 4526 nu există o cale de lumină către probă,
00: 06: 4713 deci ceea ce am făcut este că am înlocuit nicovală cu diamant negru
00: 06: 5012 cu o nicovală safir, prezentată aici,
00: 06: 5217 am forat șurubul de montare, prezentat aici,
00: 06: 5510 și am forat baioneta, aici,
00: 06: 5719 și așa am montat un LED
00: 07: 0010 direct în spatele nicovalului de safir,
00: 07: 0300, așa că acum am avut o cale ușoară către ceașca de probă.
00: 07: 0701 Deci, acum putem stimula acel eșantion
00: 07: 0925 în orice moment înainte de a le îngheța.
00: 07: 1313 Și așa se arată aici.
00: 07: 1514 deci, studentul meu absolvent, Shigeki Watanabe,
00: 07: 1700 montase proba,
00: 07: 1808 și iată titularul specimenului chiar acolo,
00: 07: 2006 iată baioneta
00: 07: 2212 și puteți vedea firul care iese,
00: 07: 2323 și firul respectiv se duce la un computer, aici,
00: 07: 2522 care va controla când vom stimula LED-ul,
00: 07: 3016 chiar înainte de îngheț.
00: 07: 3125 Deci, ceea ce veți vedea este că
00: 07: 3313 Shigeki o va monta pe o sanie
00: 07: 3523 și sania aceea va curge pe o șină
00: 07: 3717 în camera de înaltă presiune, aici, la capăt.
00: 07: 3921 Și așa în acest caz
00: 07: 4125 vom stimula înainte să-l dărâmăm pe șină,
00: 07: 4406, dar îl puteți stimula oricând
00: 07: 4520 că trece de-a lungul șinei
00: 07: 4712 în camera de înaltă presiune.
00: 07: 4821 Deci, haideți să urmărim acest videoclip.
00: 07: 5124 Deci, Shigeki a montat podul
00: 07: 5416 care ține proba în cupa specimenului în baionetă,
00: 07: 5721 și apoi baioneta este aici pe sanie.
00: 08: 0019 deci, ce se va întâmpla acum este
00: 08: 0321 va activa computerul,
00: 08: 0516 și veți vedea intermitent, chiar aici - vedeți intermitent?
00: 08: 0900 Acum, va doborî șina,
00: 08: 1026 braț și apoi în camera de înaltă presiune.
00: 08: 1227 sshppoosstt.
00: 08: 1413 corect, deci 2000 de atmosfere,
00: 08: 1528 proba este înghețată,
00: 08: 1719 și cade în azot lichid, aici.
00: 08: 1904 Deci, acum putem elimina proba
00: 08: 2023 din azotul lichid
00: 08: 2211 și o putem pune în această fixare de înlocuire a înghețului.
00: 08: 2712 Deci, ce am vrea să facem mai întâi
00: 08: 2916 este să stabilească unde și când
00: 08: 3122 are loc exocitoza,
00: 08: 3302 deci în aceste experimente
00: 08: 3504 ceea ce facem este că îți arăt
00: 08: 3618 un curent cauzat de o stimulare electrică
00: 08: 3823 a neuronului motor,
00: 08: 4011 și deci iată stimulul nostru luminos,
00: 08: 4322 și deci ceea ce vom face este să înghețăm 20 de milisecunde mai târziu,
00: 08: 4619 în timp ce există încă această transmisie sinaptică.
00: 08: 5123 Deci, ce vedem?
00: 08: 5415 Deci, mai întâi, o mică lecție de anatomie.
00: 08: 5527 Deci, ceea ce aveți aici este
00: 08: 5802 o micrografie electronică a unei joncțiuni neuromusculare C. elegans,
00: 09: 0015 și afișat în roșu, aici,
00: 09: 0229 este proiecția densă.
00: 09: 0408 Asta marchează centrul sinapselor
00: 09: 0606 și acolo sunt canalele de calciu.
00: 09: 0814 Deci, când acea sinapsă este încântată,
00: 09: 1010 calciu va curge prin această proiecție densă
00: 09: 1303 și apoi se poate activa,
00: 09: 1429 sau provoacă fuziunea veziculelor care sunt în apropiere.
00: 09: 1707 Deci, cealaltă structură pe care s-ar putea să o observați
00: 09: 2016 sunt joncțiunile aderente,
00: 09: 2200 deci, iată o joncțiune aderentă aici și aici,
00: 09: 2402 și marchează marginile zonei active.
00: 09: 2722 Zona activă definește unde se fuzionează veziculele,
00: 09: 3102, astfel încât să puteți vedea vezicule andocate
00: 09: 3224 care sunt acum evidențiate în albastru,
00: 09: 3425 și vezicule capabile de fuziune
00: 09: 3713 sunt afișate de-a lungul întregii suprafețe,
00: 09: 4017 deci, oriunde între joncțiunea aderentă
00: 09: 4301 și proiecția densă,
00: 09: 4412 aceste vezicule se pot topi atunci când sunt stimulate.
00: 09: 4703 Și așa că permiteți-mi să vă arăt câteva dintre aceste imagini.
00: 09: 4922 Deci, aici vezi vezicule care au fost.
00: 09: 5126 sunt în proces de fuziune cu membrana
00: 09: 5423 și prăbușirea în membrana plasmatică.
00: 09: 5705 Deci, prezentat aici
00: 09: 5909 este una dintre aceste vezicule
00: 10: 0023 care nu s-a contopit sau s-a aplatizat foarte departe,
00: 10: 0228 iată unul care se aplatizează,
00: 10: 0402 și iată unul.
00: 10: 0614 chiar acolo.
00: 10: 0726 și tocmai asta vedeți că tocmai s-a aplatizat
00: 10: 1005 aproape complet în membrană.
00: 10: 1115 Deci, asta înseamnă 20 de milisecunde după stimulare.
00: 10: 1413 Deci, ceea ce am vrut să știm este
00: 10: 1609 unde are loc endocitoza,
00: 10: 1711 și cât de curând după stimulare.
00: 10: 1925 Deci, ceea ce am găsit este că
00: 10: 2204 sunt două locuri
00: 10: 2408 unde are loc endocitoza veziculei sinaptice.
00: 10: 2518 Are loc la marginile zonei active,
00: 10: 2723 deci, nu în zona activă.
00: 10: 2922 Deci, se întâmplă, aici,
00: 10: 3110 la marginea proiecției dense,
00: 10: 3229 sau se întâmplă aici și aici,
00: 10: 3518 la joncțiunile aderente,
00: 10: 3819 deci, la marginile joncțiunilor aderente.
00: 10: 4009 Și acestea sunt afișate aici.
00: 10: 4115 Deci, îți arăt doar endocitoza
00: 10: 4326 care are loc la proiecția densă, aici,
00: 10: 4626 și așa a fost doar colorat ușor cu această culoare roșie.
00: 10: 4914 Și puteți vedea aici că există
00: 10: 5206 o invaginare superficială,
00: 10: 5313 și apoi acesta,
00: 10: 5425 această veziculă endocitară a fost deja tăiată
00: 10: 5618 din membrană,
00: 10: 5811 și apoi, în cele din urmă,
00: 11: 0004 ceea ce fac aceste vezicule este că
00: 11: 0201 vor migra în interiorul butonului sinaptic,
00: 11: 0423 departe de site-ul de lansare.
00: 11: 0729 Deci, acolo sunt veziculele noastre
00: 11: 1006 care au fost endocitate.
00: 11: 1317 Deci, important, aici este că
00: 11: 1603 locul [endocitozei] nu este locul fuziunii,
00: 11: 1829 că endocitoza are loc la marginile laterale
00: 11: 2027 din zona activă.
00: 11: 2308 Deci, problema este deci, cât de repede se întâmplă acest lucru?
00: 11: 2515 Și apare extrem de repede
00: 11: 2726 după acea stimulare.
00: 11: 2913 Deci, aici, acea invaginare superficială
00: 11: 3121 a fost la 20 de milisecunde după stimulare,
00: 11: 3427 această veziculă mare are 50 de milisecunde
00: 11: 3710 după stimulare,
00: 11: 3818 și apoi aici vedem că veziculele
00: 11: 4016 încep să se transloce
00: 11: 4201 în centrul [butonului sinaptic]
00: 11: 4403 100 de milisecunde după stimulare.
00: 11: 4628 Deci, iată cuantificarea acestui lucru,
00: 11: 4913 și acest lucru este important, deoarece avem o rezoluție temporală bună
00: 11: 5125 pentru a demonstra că acesta este un produs,
00: 11: 5425 o relație precursor-produs
00: 11: 5624 între fiecare dintre acești pași.
00: 11: 5825 Deci, vedem aceste gropi,
00: 12: 0018 ajung la 20 de milisecunde.
00: 12: 0227 Vedem că există aceste vezicule mari,
00: 12: 0618 ating vârful la 50 de milisecunde.
00: 12: 0827 Și apoi vedem aceste vezicule
00: 12: 1016 care încep să se transloce
00: 12: 1215 în centrul butonului,
00: 12: 1400, iar cei ating vârful la 300 de milisecunde.
00: 12: 1520 Deci, știm că acesta este procesul
00: 12: 1724 prin care trece membrana.
00: 12: 2105 Vedem că primele vezicule mari
00: 12: 2305 apar la 30 de milisecunde,
00: 12: 2415 deci atunci este momentul endocitozei,
00: 12: 2602 membrana este de fapt clivată,
00: 12: 2718 și ultimele gropi au dispărut la 50 de milisecunde.
00: 12: 3116 Deci, perioada de timp în care endocitoza
00: 12: 3324 are loc de fapt
00: 12: 3604 este de 30-50 de milisecunde.
00: 12: 4025 Deci, acest proces durează de aproximativ 1000 de ori.
00: 12: 4328 [merge] de aproximativ 1000 de ori mai repede
00: 12: 4619 decât endocitoza mediată de clatrin.
00: 12: 4927 Deci, în loc de 30 de secunde pentru endocitoza mediată de clatrin,
00: 12: 5212 vedem 30-50 de milisecunde
00: 12: 5605 pentru endocitoză ultrarapidă.
00: 12: 5726 Deci, pare să existe un mecanism foarte rapid
00: 12: 5914 care funcționează și la sinapse.
00: 13: 0227 Deci, acest lucru a demonstrat
00: 13: 0529 că acest proces funcționează în nematod,
00: 13: 0725 și acum aș vrea să vă povestesc
00: 13: 0915 unele lucrări care demonstrează
00: 13: 1103 că are loc și acest proces
00: 13: 1315 la sinapsele mouse-ului.
00: 13: 1429 Deci, ne-am făcut treaba în nematod, C. elegans,
00: 13: 1804 și este posibil ca acesta să fie un organism neobișnuit,
00: 13: 2207 că poate are o formă accelerată de endocitoză
00: 13: 2601 care nu este conservat printre alte organisme.
00: 13: 2923 Și așa, pentru a testa acest lucru,
00: 13: 3108 trebuia să ne uităm la un alt organism,
00: 13: 3224 una care este mai frecvent utilizată
00: 13: 3523 ca organism de laborator
00: 13: 3818 care reproduce ceea ce s-ar putea întâmpla în sinapsele umane,
00: 13: 4101 și acesta este mouse-ul.
00: 13: 4213 Și pentru a face această lucrare,
00: 13: 4414 am lucrat cu Christian Rosenmund
00: 13: 4524 la Charité din Berlin,
00: 13: 4726 și trebuie să dau un apel mare,
00: 13: 4924 un strigăt către Christian,
00: 13: 5126 aceasta a fost ideea lui.
00: 13: 5310 Christian a spus, de ce nu vii la Berlin
00: 13: 5515 și aduceți mostrele și dispozitivul
00: 13: 5816 și vom face experimentele
00: 14: 0027 pe neuronii hipocampului
00: 14: 0316 care au fost cultivate pe feluri de mâncare.
00: 14: 0607 Și așa mi-am adus studentul absolvent,
00: 14: 0811 Shigeki Watanabe,
00: 14: 0924 și deci ceea ce a făcut a fost să efectueze o morfometrie
00: 14: 1220 pe peste 10.000 de sinapse,
00: 14: 1426 și deci motivul pentru care aveam nevoie pentru a face acest lucru
00: 14: 1716 urma să obțină diferențe statistice
00: 14: 1925 la fiecare dintre aceste puncte de timp,
00: 14: 2117 și așa că permiteți-mi să vă arăt acele date.
00: 14: 2420 Deci, din nou, stimulăm
00: 14: 2618 cu canalodopsină.
00: 14: 2721 Și astfel ne putem lua
00: 14: 3119 neuroni hipocampici cultivați din creierul șoarecelui
00: 14: 3329 și apoi infectați-i cu un virus
00: 14: 3613 care exprimă gena canalodopsinei,
00: 14: 3927 și astfel putem face proteina,
00: 14: 4229 și acum putem stimula cu lumina.
00: 14: 4521 Și aici este un neuron hipocampic într-un vas,
00: 14: 4627 exprimă canalul rodopsină,
00: 14: 4809 îl stimulăm,
00: 14: 4913 și stimularea luminii este afișată aici în albastru, nu?
00: 14: 5329 Deci, aceasta este stimularea de 10 milisecunde,
00: 14: 5608 și în această imagine puteți vedea asta
00: 14: 5822 existau două potențiale de acțiune
00: 15: 0010 care au fost cauzate de această stimulare a luminii.
00: 15: 0325 Și așa se întâmplă destul de repede
00: 15: 0610 după debutul stimulării luminii,
00: 15: 0724 doar 5 milisecunde,
00: 15: 0924 și este extrem de robust.
00: 15: 1125 Deci, vedem doar 12% din timp
00: 15: 1406 eșecul unui potențial de acțiune.
00: 15: 1515 Așadar, am vrea să demonstrăm acum
00: 15: 1800 că asta provoacă într-adevăr transmisia sinaptică,
00: 15: 2122 și, pentru aceasta, avem o celulă care este
00: 15: 2326 care nu exprimă canalul rodopsină,
00: 15: 2612 deci nu va exista niciun răspuns luminos în acea celulă.
00: 15: 2808 Singurul răspuns luminos pe care îl va avea
00: 15: 3204 va veni din celula presinaptică
00: 15: 3405 exprimând canalul rodopsină.
00: 15: 3513 Deci, acum putem aprinde lumina,
00: 15: 3624 care activează acea celulă presinaptică,
00: 15: 3904 și apoi vedem acești curenți postsinaptici
00: 15: 4213 în această celulă, aici.
00: 15: 4424 Deci, puteți vedea că, în acest caz,
00: 15: 4615 iată stimulul luminos, prezentat în albastru,
00: 15: 4919 și încă o dată au existat două potențiale de acțiune
00: 15: 5212 în acest eșantion.
00: 15: 5402 Și deci acesta este un curent postsinaptic, prezentat aici,
00: 15: 5523 și știm că acesta este un curent sinaptic
00: 15: 5708 pentru că îl putem bloca cu un medicament numit TTX,
00: 16: 0026 și TTX blochează potențialele de acțiune.
00: 16: 0312 Deci, dacă blocați potențialul de acțiune în această celulă presinaptică,
00: 16: 0610 nu aveți nicio transmisie sinaptică.
00: 16: 1115 Și dacă blocați receptorii
00: 16: 1309 pentru neurotransmițători
00: 16: 1501 în celula postsinaptică, chiar aici,
00: 16: 1705, de asemenea, nu vedem niciun răspuns.
00: 16: 1826 Deci, acest lucru demonstrează că acestea sunt
00: 16: 2121 evenimente sinaptice de bună-credință.
00: 16: 2501 Deci, încă o dată, ce am vrea să facem
00: 16: 2714 este determinarea vitezei exocitozei
00: 16: 2919 și viteza endocitozei.
00: 16: 3205 Deci, stimulăm cu lumină,
00: 16: 3418 din nou, afișat în albastru,
00: 16: 3525 și apoi putem îngheța la 15 milisecunde,
00: 16: 3808 30 de milisecunde,
00: 16: 3915 50 de milisecunde,
00: 16: 4025 100 milisecunde,
00: 16: 4209 și așa mai departe.
00: 16: 4318 Și astfel, pentru fiecare dintre aceste experimente,
00: 16: 4506 am analizat 200 de sinapse
00: 16: 4706 pentru a vedea dacă putem vedea evenimente.
00: 16: 4926 Deci, lasă-mă să-ți dau, din nou,
00: 16: 5111 o lecție de anatomie despre
00: 16: 5404 sinapsi hipocampice de șoarece,
00: 16: 5525 și deci ceea ce puteți vedea aici este un bazin de vezicule
00: 16: 5900 care reprezintă rezerva de vezicule.
00: 17: 0312 Și apoi sunt vezicule care sunt
00: 17: 0518 ancorat la membrană, prezentat aici,
00: 17: 0806 și se pot elibera de-a lungul întregii fețe,
00: 17: 0922 așa că fața, acea regiune,
00: 17: 1113 se numește zona activă.
00: 17: 1229 Este o zonă activă, nu? vezicule fuzionează.
00: 17: 1605 Pe de altă parte este densitatea postsinaptică,
00: 17: 1915 și ce este această densitate postsinaptică.
00: 17: 2220 poziționarea canalelor ionice,
00: 17: 2427 canale ionice cu ligand,
00: 17: 2710 care va răspunde la eliberarea neurotransmițătorului.
00: 17: 3001 În acest caz, este glutamat,
00: 17: 3122 deci, glutamatul este neurotransmițătorul
00: 17: 3318 care vor deschide canale ionice cu ligand,
00: 17: 3601 și apoi va exista un curent în acea celulă postsinaptică.
00: 17: 3819 Deci, acestea sunt ușor de identificat
00: 17: 4109 în aceste micrografii electronice,
00: 17: 4320 și acestea sunt imagini atât de rafinate.
00: 17: 4601 uită-te la asta.
00: 17: 4726 Puteți vedea că, la 15 milisecunde după apariția luminii,
00: 17: 5007 puteți vedea că una dintre aceste vezicule
00: 17: 5227 a fuzionat și a format ceea ce se numește
00: 17: 5419 o figură omega, nu?
00: 17: 5600 Și asta este o vezicula care începe
00: 17: 5809 se prăbușește în membrană.
00: 17: 5917 Și apoi, aici, puteți vedea
00: 18: 0123 la 30 de milisecunde, o vezicula este aproape
00: 18: 0404 s-a prăbușit complet în membrană.
00: 18: 0515 Și acest lucru este întotdeauna direct
00: 18: 0800 din densitatea postsinaptică, nu?
00: 18: 0918 Deci, acest lucru vă arată că acolo sunt receptorii.
00: 18: 1202 Deci, zona activă, afișată în galben,
00: 18: 1500 densitate postsinaptică, afișată în roșu.
00: 18: 1629 Deci, unde sunt reciclarea veziculelor
00: 18: 2013 în raport cu locul în care se topesc veziculele?
00: 18: 2220 Și din nou vedem că endocitoza,
00: 18: 2605 reciclarea veziculelor,
00: 18: 2725 are loc la marginile sinapselor.
00: 18: 3002 Deci, aici putem vedea.
00: 18: 3203 galbenul este marginea zonei active,
00: 18: 3413 puteți vedea veziculele sunt ancorate acolo,
00: 18: 3613 și puteți vedea deja că există această indentare,
00: 18: 3823 această invaginare a membranei.
00: 18: 4025 Și apoi aici vedeți o invaginație mai profundă
00: 18: 4415 și iată o veziculă care este
00: 18: 4627 de fapt s-a despicat de membrană,
00: 18: 4821 și apoi în această ultimă imagine.
00: 18: 5016 lasă-mă să fac un pas înapoi.
00: 18: 5129 puteți vedea că există o veziculă
00: 18: 5325 care este eliberat de membrană,
00: 18: 5515 și acum se translocează
00: 18: 5716 în centrul butonului.
00: 18: 5917 Deci, procesul pe care l-am văzut în C. elegans
00: 19: 0204 apare și în neuronii hipocampici.
00: 19: 0520 Deci, cât de repede sunt reciclate veziculele?
00: 19: 0813 Din nou, procesul este foarte rapid.
00: 19: 1014 Deci, la 50 de milisecunde vedem aceste invaginații puțin adânci,
00: 19: 1309 100 de milisecunde le vedem
00: 19: 1518 invaginații adânci care sunt despicate,
00: 19: 1624 și apoi, în cele din urmă, la 300 de milisecunde
00: 19: 1911 vedem că aceste vezicule încep
00: 19: 2104 pentru a se transloca în [buton].
00: 19: 2402 Deci, procesul are loc
00: 19: 2607 50-100 milisecunde.
00: 19: 2825 Aceasta este o tomogramă, deci este o imagine 3D
00: 19: 3106 a unei micrografii electronice,
00: 19: 3303 și de ce acest lucru este important este pentru că
00: 19: 3505 vă arată că, în timp ce are loc exocitoza,
00: 19: 3804 endocitoza a început deja.
00: 19: 4015 Deci, asta se arată aici.
00: 19: 4200 Puteți vedea că acestea sunt trei vezicule care se contopesc,
00: 19: 4412 și deja vedeți aceste invaginații
00: 19: 4611 care au loc.
00: 19: 4715 Aceasta este la 50 de milisecunde,
00: 19: 4905 deci veziculele se contopesc și se prăbușesc în membrană,
00: 19: 5214 și membrana este deja preluată
00: 19: 5404 prin endocitoză ultrarapidă.
00: 19: 5520 Și așa, aici o puteți vedea din nou.
00: 19: 5711 Puteți vedea că o veziculă.
00: 20: 0000 sau, o groapă endocitică, este aici,
00: 20: 0319 și apoi aici puteți vedea că există o veziculă
00: 20: 0603 care este complet format
00: 20: 0725 și este tăiat din membrană.
00: 20: 0905 Deci, ceea ce ne spune asta este că
00: 20: 1027 proteinele și membranele
00: 20: 1327 care se aflau în vezicula sinaptică
00: 20: 1527 nu sunt aceleași care sunt endocitate.
00: 20: 1824 Deci, procesul are loc în același timp,
00: 20: 2100 vezicule se contopesc,
00: 20: 2221 este preluată membrana.
00: 20: 2610 Deci, avem un temporal.
00: 20: 3013 avem date care arată procesarea temporală a acestui lucru,
00: 20: 3311 și ceea ce vedem, în primul rând,
00: 20: 3520 este că nu există gropi acoperite pe membrana plasmatică.
00: 20: 3928 Nu vedem aceste frumoase gropi acoperite
00: 20: 4217 pe care Heuser și Reese l-au văzut în timpul endocitozei.
00: 20: 4422 Mai degrabă, vedem aceste gropi
00: 20: 4907 care se formează rapid,
00: 20: 5100 și ating vârful de aproximativ 100 de milisecunde -
00: 20: 5301 nu au paltoane pe ele.
00: 20: 5416 Vedem vezicule endocitice mari,
00: 20: 5601 ajung, de asemenea, la 100 de milisecunde.
00: 20: 5729 Și putem vedea că primele vezicule
00: 21: 0112 sunt văzute la 50 de milisecunde
00: 21: 0518 și ultimele sunt văzute la 300 de milisecunde.
00: 21: 0811 Și așa știm acum acea endocitoză
00: 21: 1100 - acesta este de fapt procesul în care membrana este tăiată
00: 21: 1221 și scoase de pe suprafață -
00: 21: 1411 are loc între 50-300 de milisecunde.
00: 21: 1917 Deci, acum avem vezicule, 100 de milisecunde,
00: 21: 2205 avem aceste vezicule
00: 21: 2322 care se află în butonul presinaptic.
00: 21: 2517 Ei bine, ce se întâmplă cu ei, nu?
00: 21: 2722 Se întorc la suprafață,
00: 21: 2929 pentru că aceasta este doar o bucată de membrană de suprafață,
00: 21: 3321 este un mod de recuperare, poate,
00: 21: 3619 tensiunea membranei în zona activă?
00: 21: 3929 Sau este acesta un proces prin care
00: 21: 4210 veziculele sinaptice sunt regenerate?
00: 21: 4404 Deci, pentru a face asta, a trebuit să putem
00: 21: 4626 urmează această membrană în celulă,
00: 21: 4816 și pentru aceasta aveam nevoie de un marker de fază fluidă,
00: 21: 5114 ceva ce am putut vedea prin microscopie electronică,
00: 21: 5319 care ar fi preluat de endocitoză.
00: 21: 5717 Deci, feritina face o particulă de 12 nanometri,
00: 22: 0018 este practic o sferă goală,
00: 22: 0209 și acea sferă goală poate ține
00: 22: 0429 4000 molecule de fier,
00: 22: 0719 și deci acest lucru se colorează foarte întunecat în micrografiile cu electroni.
00: 22: 1220 Și asta se arată aici,
00: 22: 1417 deci ceea ce vedeți este sinapsele hipocampice
00: 22: 1802 care au fost incubate în prealabil cu feritină,
00: 22: 2201 și apoi sunt stimulați.
00: 22: 2323 Și astfel puteți vedea aceste molecule întunecate de feritină, aici,
00: 22: 2621 și după stimulare,
00: 22: 2811 există 100 de milisecunde după stimulare,
00: 22: 3008 puteți vedea o groapă superficială care se formează,
00: 22: 3215 există deja endocitoză.
00: 22: 3414 Și aici puteți vedea aceste molecule de feritină
00: 22: 3624 merg în această invaginație profundă.
00: 22: 3828 Și aceasta este cea mai importantă imagine, aici.
00: 22: 4027 În acest caz, puteți vedea asta
00: 22: 4325 moleculele de feritină s-au mutat într-o veziculă endocitară.
00: 22: 4722 Acest lucru demonstrează că acest proces merge spre interior,
00: 22: 5112 că acestea sunt biți de membrană
00: 22: 5418 care apucă unele dintre particulele de feritină
00: 22: 5728 în interiorul fantei sinaptice
00: 22: 5909 și ducându-le în [butonul sinaptic].
00: 23: 0224 Deci, ceea ce aș vrea să faceți este să vă amintiți această imagine.
00: 23: 0610 Deci, asta se va întoarce
00: 23: 0812 chiar la sfârșitul discuției,
00: 23: 1013 și este o imagine care va arăta foarte asemănător.
00: 23: 1320 deci, prezența feritinei
00: 23: 1506 mergând în aceste structuri endocitice.
00: 23: 1822 Ce se întâmplă după aceea?
00: 23: 2125 Deci, din nou, asta am văzut înainte,
00: 23: 2303 această endocitoză rapidă,
00: 23: 2412 și dacă urmărim asta în timp
00: 23: 2618 vedem că după 3 secunde,
00: 23: 2816 vedem că acea feritină
00: 23: 3118 s-a mutat într-un endosom,
00: 23: 3224 un endosom sinaptic,
00: 23: 3329 și la 10 secunde după aceea vedem că ei.
00: 23: 3620 moleculele de feritină se află în vezicule sinaptice.
00: 23: 3907 Este puțin greu să le vezi,
00: 23: 4117 deci dacă stimulăm mai intens.
00: 23: 4309 încă o dată, la 3 secunde
00: 23: 4505 puteți vedea feritina în interiorul acestor endosomi sinaptici,
00: 23: 4821 și aici, după 10 stimuli.
00: 23: 5117 la 10 secunde,
00: 23: 5317 puteți vedea că există vezicule sinaptice, mai multe dintre ele,
00: 23: 5523 care au aceste molecule de feritină în ele,
00: 23: 5727 deci acest lucru demonstrează cu adevărat că acesta este un proces
00: 24: 0108 pentru regenerarea veziculelor sinaptice.
00: 24: 0508 Cum se rezolvă acel endosom sinaptic?
00: 24: 0801 Și ceea ce puteți vedea aici este că,
00: 24: 0923 acum, vedem aceste haine,
00: 24: 1115 la fel cum au văzut Heuser și Reese,
00: 24: 1429 am văzut dovezi ale straturilor de clatrin.
00: 24: 1626 Și așa, iată ce, din nou,
00: 24: 1922 o groapă normală acoperită cu clatrin arată,
00: 24: 2402 și care apare pe corpul celulei,
00: 24: 2529 și iată unul dintre acești muguri acoperiți
00: 24: 2821 pe endosom,
00: 24: 3004 și uite cât de familiare sau similare sunt.
00: 24: 3124 Deci, iată procesul,
00: 24: 3323 iată una dintre aceste runde,
00: 24: 3614 endosomi sinaptici sferici
00: 24: 3827 la 1 secundă, și apoi la 1 secundă, aici,
00: 24: 4028 vedem că se formează muguri,
00: 24: 4209 și apoi iată un alt exemplu, la 3 secunde,
00: 24: 4427 a formării unui mugur.
00: 24: 4715 Și atunci acesta este un. Îmi place această imagine.
00: 24: 4828 iată unul dintre acești endosomi sinaptici
00: 24: 5017 care este sfâșiat de câini sălbatici, nu?
Adică există un mugur.
00: 24: 5500 patru muguri diferiți în acest proces,
00: 24: 5616 distruge complet endosomul sinaptic,
00: 24: 5911 și devine practic invizibil pentru noi
00: 25: 0126 în micrografii electronice după aceasta.
00: 25: 0516 Deci, dacă ne uităm acum la viteza acestui proces,
00: 25: 0829 vedem că aceste gropi adânci
00: 25: 1127 s-au format între 50-100 de milisecunde,
00: 25: 1403 acestea formează apoi vezicule endocitice mari
00: 25: 1702 - acestea au un diametru de aproximativ 80 nanometri -
00: 25: 1915 și cele se formează la 100 de milisecunde,
00: 25: 2219 ating vârful la 100 de milisecunde.
00: 25: 2500 Acești endosomi sinaptici ating vârful la 1 secundă,
00: 25: 2704 apoi veziculele acoperite cu clatrin ating vârful la 3 secunde,
00: 25: 3127 și apoi vedeți endosomi sinaptici.
00: 25: 3412 scuze, vezicule sinaptice,
00: 25: 3620 și ating vârful la 10 secunde,
00: 25: 3905 și credem că t1 / 2,
00: 25: 4119, adică jumătatea timpului pentru a crea aceste vezicule sinaptice,
00: 25: 4509 este doar 5 secunde,
00: 25: 4700 deci procesul este foarte rapid.
00: 25: 4905 Deci, ceea ce trebuie să concluzionăm acum este că
00: 25: 5229 există un alt proces, această endocitoză ultrarapidă,
00: 25: 5628 care apare de 600 de ori mai repede
00: 25: 5911 decât endocitoza mediată de clatrin, aici.
00: 26: 0112 Deci, asta durează 30 de secunde,
00: 26: 0300 și ceea ce am văzut este că
00: 26: 0429 are loc endocitoza ultrarapidă
00: 26: 0716 cu o viteză de 50 de milisecunde,
00: 26: 0827 deci, de 600 de ori mai rapid.
00: 26: 1125 Deci, acum avem un conflict, nu?
00: 26: 1423 Heuser și Reese văd endocitoza mediată de clatrin,
00: 26: 1815 durează 30 de secunde.
00: 26: 1920 Vedem endocitoza ultrarapidă,
00: 26: 2129, care durează aproximativ 50 de milisecunde.
00: 26: 2406 Deci, datele nu sunt de acord.
00: 26: 2600 Deci, putem concilia aceste rezultate contradictorii?
00: 26: 3011 Și cred că putem.
00: 26: 3212 Deci, problema este atunci de ce rezultatele noastre
00: 26: 3627 diferă de studiile anterioare asupra neuronilor hipocampici?
00: 26: 3816 Acestea au fost studiate de mulți, mulți ani,
00: 26: 3929 și s-a observat întotdeauna că
00: 26: 4223 există structuri endocitice mediate de clatrin.
00: 26: 4725 Și credem că știm motivul.
00: 26: 4916 Pentru că atunci când Shigeki își făcea experimentele,
00: 26: 5221 făcea asta întotdeauna la
00: 26: 5423 o temperatură fiziologică, fie 34 de grade, fie 37 de grade,
00: 26: 5805 este temperatura la care trăiește în mod normal un mouse,
00: 27: 0014 și în această imagine la 3 secunde după stimulare,
00: 27: 0405 vezi formarea
00: 27: 0529 fie o veziculă endocitară mare
00: 27: 0710 sau unul dintre acești endosomi sinaptici,
00: 27: 0901 și asta, din nou, era la 34 de grade.
00: 27: 1121 vedem endocitoză ultrarapidă.
00: 27: 1326 Shigeki apoi, de la citirea literaturii,
00: 27: 1621 și-a dat seama că toți ceilalți își făceau experimentele
00: 27: 1905 la temperatura camerei, la 22 de grade,
00: 27: 2107 așa că și-a făcut apoi experimentele la 22 de grade,
00: 27: 2325 a înghețat la 3 secunde și uite ce vezi.
00: 27: 2604 Iată o veziculă acoperită cu clatrin chiar aici,
00: 27: 2907 o frumoasă veziculă acoperită cu clatrin,
00: 27: 3014 și iată o extindere în această inserție.
00: 27: 3209 Încă o dată, uită-te la frumoasa asta
00: 27: 3427 groapă acoperită cu clatrin.
00: 27: 3604 Deci, acum credem că ceea ce se întâmplă este că
00: 27: 3903 dacă vă faceți experimentele la 37 de grade sau 34 de grade,
00: 27: 4413 veți vedea endocitoza ultrarapidă,
00: 27: 4613 dar la 22 de grade
00: 27: 4812 predomină endocitoza mediată de clatrin.
00: 27: 5101 Și așa se arată aici.
00: 27: 5317 Dacă îți faci experimentele la 34 de grade,
00: 27: 5512 practic nu vedem gropi acoperite
00: 27: 5807 pe membrana plasmatică,
00: 27: 5923 care este endocitoza mediată de clatrin,
00: 28: 0211 dar vedem acești endosomi,
00: 28: 0408 care caracterizează endocitoza ultrarapidă.
00: 28: 0614 La 22 de grade, acum vedem asta
00: 28: 1105 există aceste gropi acoperite care apar pe membrană,
00: 28: 1219 prezentat aici,
00: 28: 1407 și aceasta este dovada unei endocitoze mediate de clatrin.
00: 28: 1524 Cu toate acestea, nu vedem niciunul dintre acești endosomi,
00: 28: 1821 din nou, semnătura endocitozei ultrarapide.
00: 28: 2206 Deci, credem că acest lucru explică
00: 28: 2411 diferența dintre experimentele noastre
00: 28: 2606 și cele de la alte laboratoare.
00: 28: 2909 Deci, cum putem pune aceste lucruri împreună?
00: 28: 3110 Ei bine, ceea ce credem că se întâmplă este că
00: 28: 3409 în mod normal, ceea ce se întâmplă este că
00: 28: 3618 Endocitoza ultrarapidă răspunde
00: 28: 3907 pentru stimuli normali, stimuli simpli normali.
00: 28: 4300 Toate experimentele noastre sunt terminate
00: 28: 4515 cu unul sau zece stimuli, nu foarte mulți.
00: 28: 4724 Dar, ceea ce se poate întâmpla este atunci când este o sinapsă
00: 28: 5101 supuse unei stimulări extreme, de înaltă frecvență,
00: 28: 5518 sau cereri mai mari,
00: 28: 5729 că trebuie să introduceți un alt mecanism, iar aceasta este endocitoza mediată de clatrin,
00: 29: 0024 și acționează ca un sistem de rezervă de urgență
00: 29: 0303 când eșuează endocitoza ultrarapidă.
00: 29: 0616 Trebuie făcute mai multe experimente
00: 29: 0808 pentru a testa această ipoteză,
00: 29: 1010, dar este cel puțin un mod de gândire
00: 29: 1214 aceste rezultate diferite.
00: 29: 1419 Deci, asta nu se întâmplă.
00: 29: 1704, de ce se deosebesc aceste experimente
00: 29: 1820 de la alți oameni care studiază sinapsele hipocampice.
Nu prea clarifică
De ce Heuser și Reese au obținut rezultate diferite.
Și aș vrea să mă întorc la literatură
00: 29: 2925 și să-ți arăt că cred
00: 29: 3215 chiar și aceste rezultate pot fi reconciliate.
00: 29: 3507 Deci, aceste experimente se făceau
00: 29: 3706 la joncțiunea neuromusculară broască,
00: 29: 3820 și vrem să știm de ce diferă aceste rezultate.
00: 29: 4207 Și așa imaginile pe care ți le-am arătat pentru sincronizare
00: 29: 4515 au fost aceste imagini de îngheț.
00: 29: 4714 Și deci acesta este un caz în care acest lucru este stimulat.
00: 29: 5015 5 milisecunde vedem exocitoză, vedem fuziune.
00: 29: 5319 30 de secunde mai târziu vedem endocitoză,
00: 29: 5629 vedem că veziculele sunt reciclate.
00: 29: 5920 Dar problema este,
00: 30: 0206 unde sunt secțiunile transversale? Dreapta?
00: 30: 0415 În mod normal, nu ați urmări acest lucru
00: 30: 0820 prin această fractură.
00: 30: 1012 Acestea sunt imagini frumoase,
00: 30: 1211, dar ne-ar plăcea să știm ce se întâmplă în membrană
00: 30: 1500 în acest caz.
00: 30: 1700 Sunt aceste vezicule endocitice mediate de clatrin?
00: 30: 2215 Și așa am căutat prin toate hârtiile lor
00: 30: 2408 și nu am putut găsi niciodată
00: 30: 2615 acele secțiuni transversale,
00: 30: 2800 dar sunt sigur că le-ar fi făcut, nu?
00: 30: 2924 Deci, în cele din urmă, am contactat
00: 30: 3203 un negustor de carte antichitar,
00: 30: 3308 pentru că acesta a fost un articol pe care nu l-am putut găsi,
00: 30: 3501 Nu am putut obține o copie a,
00: 30: 3617 și a fost acest capitol din această carte
00: 30: 3916 numit „Neurocsiences” de MIT Press, în 1979.
00: 30: 4314 Și așa negustorul de carte antichitar
00: 30: 4725 mi-a vândut acea carte
00: 30: 4916 și m-am uitat la acel capitol
00: 30: 5107 și erau acele secțiuni transversale.
00: 30: 5218 Aceasta este doar o poveste frumoasă, aici.
00: 30: 5612 Iată o joncțiune neuromusculară
00: 30: 5905 care a fost stimulat la 10 Hz timp de 5 minute,
00: 31: 0120 deci, stimulare de înaltă frecvență.
00: 31: 0401 Și poți vedea aceste frumoase,
00: 31: 0628 gropi rafinate acoperite cu clatrin.
00: 31: 0807 Iată unul în care s-a format stratul de clatrin,
00: 31: 1102 și iată un altul în care vezicula
00: 31: 1300 este stors, pe cale să fie tăiat.
00: 31: 1506 Deci, asta a fost după o stimulare intensă.
00: 31: 1917 Dar în ziarul Miller și Heuser,
00: 31: 2129 au existat și imagini cu înghețare
00: 31: 2504 care arăta ceva misterios,
00: 31: 2617 că au remarcat după doar 1 secundă
00: 31: 2924 după stimulare.
00: 31: 3106 Și acestea sunt afișate aici.
00: 31: 3218 deci, aici, afișat în roșu,
00: 31: 3421 Am încercuit aceste alte indentări
00: 31: 3816 care par a fi evenimente endocitice,
00: 31: 4014 și rețineți că există această structură albă aici,
00: 31: 4219 structură albă aici.
00: 31: 4500 Aceasta este gheața care este tăiată
00: 31: 4616 gâtul acelei vezicule endocitice,
00: 31: 5100 sugerând că, dacă am putea privi înăuntru într-o secțiune transversală,
00: 31: 5320 am putea vedea structuri endocitice.
00: 31: 5505 Deci, unde sunt aceste secțiuni?
00: 31: 5714 Iată-le.
00: 31: 5916 Deci, aceasta este una dintre imagini
00: 32: 0129 preluat din acel capitol de carte,
00: 32: 0307 foloseau feritină pentru a urmări formarea acestor vezicule,
00: 32: 0526 și de aceea am spus,
00: 32: 0714 „amintește-ți această imagine”,
00: 32: 0907 pentru că arată foarte asemănător
00: 32: 1109 la imaginile pe care ți le-am arătat.
00: 32: 1215 Deci, aici este feritina
00: 32: 1519 preluat în aceste invaginații.
00: 32: 1716 Iată încă una.
00: 32: 1909 Unele dintre aceste invaginații sunt destul de mari,
00: 32: 2104 prezentat aici,
00: 32: 2214 și apoi iată o veziculă
00: 32: 2409 care a fost despicat de membrană
00: 32: 2520 care conține feritină,
00: 32: 2705 demonstrând că acestea sunt într-adevăr evenimente endocitice.
00: 32: 3005 Rețineți că aceasta a fost o sinapsă care a fost stimulată
00: 32: 3305 o dată
00: 32: 3419 și înghețat 1 secundă mai târziu.
00: 32: 3614 Deci, în loc de stimulare ridicată,
00: 32: 3802 stimulează o singură dată.
00: 32: 4103 mult mai asemănător cu genul de experimente pe care le-am descris.
00: 32: 4410 Deci, cred că Heuser și Reese
00: 32: 4802 a văzut totul, au avut datele,
00: 32: 5008 aveau imagini,
00: 32: 5208 și singurul lucru care cred că ar fi putut fi răsturnat
00: 32: 5508 este descris în discuția lor.
00: 32: 5717 Deci, aici, se spune,
00: 32: 5919 când ne uităm la aceste cisterne rapide,
00: 33: 0305 pe care tocmai ți le-am arătat cu feritina în ele,
00: 33: 0604 spun ei: „Aproape toate gropile neacoperite s-au format
00: 33: 0909 în primele secunde
00: 33: 1105 după exocitoză ".
00: 33: 1225 "Gropile neacoperite pot să nu apară deloc
00: 33: 1509 în timpul funcționării normale a sinapsei. "
00: 33: 1800 Apoi vorbesc despre aceste gropi acoperite lent,
00: 33: 2008 aici și se spune:
00: 33: 2120 „Se recuperează alte [membrane]
00: 33: 2323 în următoarele 90 de secunde
00: 33: 2600 prin gropi acoperite ".
00: 33: 2811 "Calea gropilor acoperite este.
00: 33: 2914 fiziologic mai semnificativ. "
00: 33: 3129 Deci, cred că ambele apar,
00: 33: 3403 Cred că în stimulare cu frecvență joasă
00: 33: 3612 vedem acest mecanism ultrarapid,
00: 33: 3810 și apoi, sub stimulare de înaltă frecvență,
00: 33: 4121 poate că predomină acest mecanism acoperit cu clatrin.
00: 33: 4701 Deci, pe scurt,
00: 33: 4917 ceea ce ți-am arătat în acest al doilea videoclip
00: 33: 5203 este că există acest mecanism numit endocitoză ultrarapidă
00: 33: 5512 care funcționează la sinapse
00: 33: 5703 pentru recuperarea veziculelor sinaptice.
00: 33: 5927 Durează aproximativ 30-300 de milisecunde
00: 34: 0304 pentru recuperarea membranei
00: 34: 0428 de pe suprafața membranei plasmatice.
00: 34: 0716 Acești endosomi sinaptici se formează
00: 34: 1017 după aproximativ o secundă.
00: 34: 1218 clatrin. acestea sunt apoi rezolvate prin înmugurirea clatrinei
00: 34: 1417 după 3 secunde,
00: 34: 1606 și apoi vedem formarea veziculelor sinaptice
00: 34: 1806 după 5 secunde.
00: 34: 2104 Deci, aceasta este în paralel
00: 34: 2404 la acest alt mecanism,
00: 34: 2521 clasica endocitoză mediată de clatrin,
00: 34: 2720 care reformează veziculele, veziculele complete,
00: 34: 3101 chiar de la membrană,
00: 34: 3309, astfel încât să fie pur și simplu neacoperite
00: 34: 3415 pentru a regenera o veziculă sinaptică născută,
00: 34: 3710 care pot fi reumplute și apoi refolosite.
00: 34: 4115 Așadar, aș dori să închei recunoscând
00: 34: 4318 oamenii care au făcut această muncă.
00: 34: 4429 S-a făcut microscopia electronică
00: 34: 4700 de Shigeki Watanabe,
00: 34: 4826 care este acum o facultate la Johns Hopkins.
00: 34: 5122 Toate instrumentele au fost de Wayne Davis, în laboratorul meu.
00: 34: 5415 Și atunci trebuie să mulțumesc
00: 34: 5617 Christian Rosenmund și postdoctorii din laboratorul său
00: 35: 0022 pentru că ne-a găzduit și ne-a permis să facem aceste experimente
00: 35: 0316 în laboratorul lor,
00: 35: 0420 și au condus toată fiziologia,
00: 35: 0619 electrofiziologie, care a fost făcută pe aceste celule.
00: 35: 0916 Deci, vă mulțumesc că ați ascultat.
00: 35: 1113 Erik Jorgensen de la Universitatea din Utah.

  • Partea 1: Transmisie sinaptică

Funcțiile veziculelor

După cum se vede din diferitele tipuri de vezicule, acestea pot fi implicate în flotabilitate și optimizarea fotosintezei (vezicule de gaz), semnalizare intercelulară și schimb de materiale (exosomi), digestie intracelulară (lizozomi), transport și secreție (vezicule care apar din rețeaua Golgi). Poate transporta orice tip de marfă, de la boli apoptotice mari și agenți patogeni la biopolimeri, precum și materiale reziduale. Sunt necesare pentru formarea și menținerea membranei plasmatice, a matricei extracelulare și a structurii citoplasmatice interne. Veziculele sunt, de asemenea, cruciale pentru funcționarea celulelor implicate în digestia extracelulară, cum ar fi cele care acoperă organele digestive, cum ar fi glandele salivare. În cele din urmă, un organism menține homeostazia coordonând acțiunile diferitelor organe prin sistemele sale nervoase și endocrine. Ambele sisteme de organe au nevoie de buna funcționare a rețelei veziculare pentru a-și îndeplini sarcinile.


Biologia celulară a delaminării celulare a crestei neuronale și EMT

Lisa A. Taneyhill, Rangarajan Padmanabhan, în Neural Crest Cells, 2014

Defalcarea Laminelor bazale

Lamina bazală este o matrice proteică fibroasă care înconjoară tubul neural și este localizată și la suprafața bazală a ectodermului. Constituentul major al laminei bazale la nivelurile craniale și axiale ale trunchiului este laminina, pe lângă fibronectină, colagen I și colagen IV [111-113]. Inițial, lamina bazală este continuă cu ectodermul. În timpul neurulației, placa neuronală se invaginează și pliurile neuronale se ridică pentru a forma NCC la regiunea articulației dintre ectodermul neural și neural, perturbând astfel lamina bazală continuă. La formarea tubului neural, lamina bazală se resigilează în jurul tubului neural și a ectodermului, cu excepția tubului neural dorsal unde se află NCC premigrator. Foarte important, lamina bazală nu este complet reconstituită în cap până când nu au emigrat toate NCC [9,73]. S-a sugerat inițial că lamina bazală ar putea servi drept barieră fizică pentru migrație, cu defalcarea ei necesară pentru emigrare [114]. Acest lucru a fost confirmat de observația că lamina bazală este impenetrabilă pentru emigrarea NCC [115]. Totuși, Martins-Green și Erickson [116] au arătat că absența laminei bazale este o necesitate, dar lamina bazală în sine nu constituie o barieră fizică pentru emigrarea NCC. Examinarea microscopică electronică a embrionilor de șoarece, pui, salamandră și pește zebră a arătat că lamina bazală nu este prezentă în regiunea care acoperă NCC, cu cel puțin 10 ore înainte de EMT în trunchi și chiar înainte de EMT în regiunea craniană [5.117-121 ]. Cu toate acestea, în cap, emigrarea NCC și pierderea laminei bazale par a fi direct corelate, deși sunt necesare studii detaliate pentru a delimita relația exactă dintre aceste două procese. Interesant este faptul că emigrația NCC și degradarea laminei bazale sunt independente, deoarece expresia Ets-1 fosforilabil stimulează delaminarea și emigrația NCC și este asociată cu degradarea laminei bazale, în timp ce exprimarea unei Ets-1 ne-fosforilabile are ca rezultat doar emigrarea NCC [13]. Cu toate acestea, degradarea bazinei lamelei în trunchi nu este corelată cu NCC EMT [116], probabil pentru că la acest nivel axial apare o delaminare NCC susținută. Dat fiind Ets-1 nu este detectat în trunchi, este tentant să speculăm că funcția Ets-1 ar putea explica diferența în rolul laminei bazale în NCC EMT în cap și trunchi.

NCC poate secreta o varietate de proteaze pentru a degrada potențial lamina bazală. Puiul cranian și trunchiul NCC sintetizează activatorul plasminogenului în timpul migrației in vitro [122-124], care la rândul său poate degrada mai multe proteine ​​de suprafață celulară și componente ale matricei extracelulare (ECM) întâlnite în timpul migrației (revizuite în [125]). Recent, s-a descoperit că o serie de metaloproteaze matriciale (MMP) și ADAM joacă roluri importante în migrarea NCC. MMP-2 și inhibitorul său natural, TIMP-2, sunt exprimate în timpul migrației NCC cardiace aviare [126-128]. Experimente recente dezvăluie că liderul care migrează cranian NCC exprimă Mmp-2 în timp ce celulele în urmă nu [129]. MMP-2 este esențial pentru EMC NCC normal, deoarece inhibitorii MMP-2 (BB-94 [128], KB8301 [127]) provoacă o migrație aberantă a NCC cardiac și respectiv a trunchiului. În mod similar, eliminarea MMP-2 perturba puiul NCC EMT, dar nu are efecte asupra migrației NCC care s-au separat deja de tubul neural [128]. MMP-9 este o altă protează exprimată în delaminarea și migrarea NCC atât la nivel cranian cât și la nivelul trunchiului [130]. Blocarea chimică a MMP-9 reduce dramatic delaminarea și migrația NCC fără specificații sau supraviețuire perturbatoare, sugerând un rol pentru MMP-9 în detașarea NCC din tubul neural, precum și în migrarea acestora. În schimb, supraexprimarea MMP-9 sau adăugarea de medii condiționate MMP-9 îmbunătățește migrația NCC și stimulează emigrarea precoce in vitro și in vivo. Substraturile pentru MMP-9 includ laminină și într-o măsură mai mică N-cadherină [130]. Având în vedere că sa demonstrat că Ets-1 reglează în sus mai multe MMP-uri in vitro și in vivo (revizuit în [131]) și că este exprimat în capul puilor [13], este posibil ca Ets-1 să stimuleze delaminarea NCC craniană a puilor prin reglarea în sus a expresiei MMP.

ADAM13 este unul dintre cele mai bine caracterizate ADAM în contextul NCC EMT și îndeplinește mai multe funcții, în afară de clivajul Cadherin-11, întrucât epuizarea cadherin-11 nu este suficientă pentru salvarea knockdown-ului ADAM13 [132]. ADAM13 este procesat de γ-secretaza pentru a elibera un fragment citoplasmatic care se translocează în nucleu [133], iar acest fragment reglează expresia mai multor gene în NCC cranian [133]. În concordanță cu aceasta, expresia unui ADAM13 mutant lipsit de domeniul său citoplasmatic nu poate salva fenotipul ADAM13 knockdown (inhibarea migrației NCC craniene), sugerând că translocația nucleară a domeniului citoplasmatic este crucială pentru promovarea EMT NCC craniană in vivo. Mai mult, ADAM13 poate lega, cliva și remodela un substrat de fibronectină in vivo, promovând astfel migrația NCC [134] și este necesară celula autonom [132]. Interesant este că ADAM13 își poate executa funcțiile prin cooperarea cu ADAM19, întrucât knockdown-ul dublu ADAM13 și ADAM19 inhibă mai puternic migrația NCC decât knockdown-urile unice, iar domeniul citoplasmatic ADAM19 salvează fenotipul embrionilor knockdown ADAM13 [133]. ADAM19 a fost, de asemenea, identificat pentru a juca un rol în inducere Xenopus NCC cranian [135], dar rolul său în NCC EMT nu este clar. În capul puiului, ADAM19 și γ-secretaza sunt exprimate în NCC premigrator și migrator, iar ADAM10 este exprimat numai prin NCC premigrator. Ambele ADAM funcționează pentru a procesa Cad6B (datele noastre nepublicate).


Reclamație DMCA

Dacă credeți că conținutul disponibil prin intermediul site-ului web (așa cum este definit în Termenii și condițiile noastre) încalcă unul sau mai multe drepturi de autor, vă rugăm să ne anunțați furnizând o notificare scrisă („Notificare de încălcare”) care conține informațiile descrise mai jos către persoana desemnată agent listat mai jos. Dacă Tutorii Varsity iau măsuri ca răspuns la o Notificare privind încălcarea dreptului, va face o încercare de bună credință de a contacta partea care a pus la dispoziție un astfel de conținut prin intermediul celei mai recente adrese de e-mail, dacă este cazul, furnizată de către o astfel de parte Tutorilor Varsity.

Notificarea dvs. de încălcare poate fi transmisă părții care a pus la dispoziție conținutul sau unor terțe părți, cum ar fi ChillingEffects.org.

Vă rugăm să rețineți că veți fi răspunzător pentru daune (inclusiv costurile și onorariile avocaților) dacă declarați în mod eronat că un produs sau activitate vă încalcă drepturile de autor. Astfel, dacă nu sunteți sigur că conținutul localizat sau legat de site-ul web vă încalcă drepturile de autor, ar trebui să luați în considerare mai întâi contactarea unui avocat.

Urmați acești pași pentru a depune o notificare:

Trebuie să includeți următoarele:

O semnătură fizică sau electronică a proprietarului dreptului de autor sau a unei persoane autorizate să acționeze în numele său. detalii pentru a permite Tutorilor Varsity să găsească și să identifice în mod pozitiv acel conținut, de exemplu, avem nevoie de un link către întrebarea specifică (nu doar numele întrebării) care conține conținutul și o descriere a porțiunii specifice a întrebării - o imagine, o link, text, etc - reclamația dvs. se referă la numele dvs., adresa, numărul de telefon și adresa de e-mail și o declarație a dvs.: (a) că credeți cu bună-credință că utilizarea conținutului despre care pretindeți că vă încalcă drepturile de autor este neautorizat prin lege sau de către proprietarul drepturilor de autor sau agentul respectivului proprietar (b) că toate informațiile conținute în notificarea dvs. privind încălcarea dreptului sunt corecte și (c) sub pedeapsa mărturiei mincinoase, că sunteți fie proprietarul drepturilor de autor sau o persoană autorizată să acționeze în numele lor.

Trimiteți reclamația agentului nostru desemnat la:

Charles Cohn Varsity Tutors LLC
101 S. Hanley Rd, Suite 300
Louis, MO 63105


Priveste filmarea: Clătite simple rețetă pas cu pas - Laura Laurențiu (Ianuarie 2022).